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- 2020-09-10 发布于福建
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选修三
现代生物科技专题
专题一基因工程
基因工程的原理及技术
1、原理:
基因工程的别名基因拼接技术或DNA重组技术
操作环境
生物体外
操作对象
基因
操作水平
DNA分子水平
基本过程
剪切→拼接→导入→表达
结果
人类需要的基因产物
2、技术:
(1)基本工具
限制性核酸内切酶-“分子手术刀”
分布:主要在原核生物中
特点:恃异性,即识别特定核苷酸序列,切割特定
切点
结果:产生黏性未端或平末端
举例:大肠杆菌的一种限制酶能识别 GAATTC序列,
并在G和A之间切开
◆一种限制酶只能识别一种特定的
核苷酸序列,并在每一条链中特定
部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯
键断开。(断开的不是氢键)
双链DNA结构和磷酸二酯键位置
磷酸二酯腿Q
切割DNA分子时产生的两种不同末端
EcoR/ GAA: TrC
G AATTC
在G与A之CTT:AAG
caTan
G
黏性末端
中轴线
CCCHGGG
GGG
(G与C之eGGG!CCC
GGG
CCO
中轴线
平末端
分子缝合针DNA连接酶
连接酶的作用是:将互补配对的两个黏性末端连接起来,
使之成为一个完整的DNA分子。
(恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键)
连接酶的分类
根据酶的来源分:
1.E. coli dNa连接酶:只能“缝合”DNA片段互补的黏
性末端
2.T4DNA连接酶:能“缝合”DNA片段互
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