转基因动物与动物克隆.ppt

第十四章转基因动物和动 物克隆 转基因动物(概念、研究、问题 、转基因的“动物药厂” 抗感染动物 四、转基因动物技术路线中的转基因胚胎干细 胞 五、基因敲除的小鼠模型(概念、方法、特点 六、克隆羊和动物克隆(概念、意义) 七、克隆人 线/从输那管洗出受精卵 显微注射法在前核内 异体DNA 闬吸管固定细胞 怀孕的雌小 怀孕的雌 新生小赋 R片段显示转基因的片段 转基因动物的概念 所谓转基因动物就是把外源性目的基因导入动 物的受精卵或其囊胚细胞中,后改用注入受精 卵的任何一个前核,并在细胞基因组中稳定整 合,再将合格的重组受精卵或囊胚细胞筛选出 来,采用借腹怀孕法寄养在雌性动物( foster mother)的子宫内,使之发育成具表达目的基因 的胚胎动物,并能传给 。这样,生育的 动物为转基因动物。这类动物由于外源性目的 基因的稳定存在而赋于子代动物个体。 如图14-1 转基因的“动物药厂” 为了使转基因动物体内能产生大量的目的蛋白, 满足应用的需求,人们特别希望转基因动物能 在某些腺体细胞内产生并被分泌到体外,而哺 乳动物的乳腺就是一个理想的外分泌器官。若 目的基因所限定在乳腺细胞中大量表达,就 从转基因的动物乳汁里获得需要的基因产物。 这时转基因动物乳腺就成为一个为生产某种生 物活性蛋白的生物反应器(乳腺反应器)。转 基因动物总有一天会成为“动物药厂” 可以持续地将人们所希望的蛋白质基因(你所 宠爱的基因、YFG)。 下一页 三、抗感染动物 大型畜牧场由于牲畜饲养或放牧规模大,一旦 被传染性细菌或病毒感染,很快就会传播扩散, 造成大批动物发病或死亡。尽管现已有一些疫 苗用于预防接种及一些抗感染药物用于治疗, 但培育抗感染动物是人们长久以来的期望。目 前已经有人试验将特定基因导入动物体内,培 育出产生特异性抗体的转基因动物来提高其抗 传染性细菌、抗病毒的能力。有望提高牲畜的 抗病毒能力,有较大的应用价值。 四、转基因动物技术路线中的 转基因胚胎干细胞 胚胎干细胞(ES)可从鼠胚胎外胚层中 分离获得,既可体外培养建株,又具全 能分化潜能。ES细胞接种适当小鼠胚胎 中产生嵌合小鼠。若将外源基因转入ES 细胞后,再接种到胚胎中可产生转基因 嵌合小鼠。迄今,只有培养的小鼠ES细 胞可以分化为体细胞或胚系细胞。而其 他动物如羊、牛和猪的ES细胞都没有这 种能力。(采用ES细胞的优点) 五、基因敲除的小鼠模型的建 立方法 培育基因靶向性敲除小鼠的实施步骤为: 首先将某基因突变位点经同源重组引入小鼠 ES细胞。 2.将含有靶向敲除的突变基因位点的ES细胞注 入小鼠早期胚胎中,孕育出嵌合小鼠,此嵌合小 鼠体内胚系细胞群和体细胞群都会有来自ES细 胞和受者胚胎鼠细胞的DNA。 3.检测嵌合小鼠交配后的生殖细胞内是否整 有突变的基因位点。 4.在各只敲除的突变基因位点杂合性小鼠之间 交配,以产生纯合性基因敲除小鼠。 克隆羊和动物克隆 动物克隆和转基因动物的技术不同,动物克隆 技术是核移植的一种无性繁殖法,把经过处理 的成年动物体细胞(如羊乳腺细胞)和另一只 动物的去核卵细胞(如羊卵细胞)进行细胞融 合,短期培养以后形成胚胎细胞,再植入借腹 怀孕的寄养的母体子宫内,使发育成提供体细 胞遗传的那只动物的克隆。克隆羊的培育是核 移植的无性繁殖,是体细胞的整套基因导入 克隆羊只是从供体细胞中获得遗传物质,因此 克隆羊是与供体羊遗传性状完全一模一样,这 种通过无性繁殖方式进行动物克隆打破了传统 的有性生殖概念。(如图1、图2) 转基因动物存在的问题 1.随即整合如何控制 如何使目的基因定位在特定组织中 导致畸形产生的问题 β-乳球白启动子 将DNA注射于前核 支拧吸臂 移植于搬怀孕的母竿 牛、羊的乳中蛋白质 用PCR鉴定转基因小羊 大多为酪蛋白、阝乳 YG只在乳 清蛋白、酸性蛋白、 表达时需由特定的启 从转因动物采果乳汁 动子调节分泌出来, G产物分泌于乳汁中 该启动子定位在乳腺 分级分感乳汁懂白质 细胞中。现将该启动 子克隆出来用于转基 目月 因动物中。 捏鍾YF产物