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12 100 12 100 12 100 12 100 12 100 12 100 现代生物科技专题复习 ;.; * 工具 基因工程 操作程序 应用 限制酶：来源、特点、作用 DNA连接酶：种类、作用 载体：作用、必需具备的条件、种类 获取目的基因:3种方法；PCR原理、前提、条件、过程，结果 构建基因表达载体：作用；组成及各组分的作用； 导入受体细胞：植物、动物、微生物 目的基因的检测和鉴定：分子水平（存在；转录；翻译）；个体水平 动物 植物 医疗卫生：乳腺生物反应器、基因治疗 ;.; * 植物细胞工程 动物细胞工程 细胞工程 动物细胞培养 体细胞核移植技术 与克隆动物 动物细胞融合 单克隆抗体 过程 条件 应用 概念 过程 应用前景 概念 过程 应用 植物组织培养 植物体细胞杂交技术 原理、过程、条件 过程、概念优势 ;.; * 胚胎工程 体内受精和早期胚胎发育 精子和卵子的发生 受精 精子的发生 卵子的发生 准备阶段 受精阶段 体外受精和早期胚胎培养 试管动物技术 卵母细胞的采集和培养 精子的采集和获能 受精 体外受精 胚胎移植的现状和意义 早期胚胎培养 胚胎移植 胚胎工程的应用及前景 精子的获能 卵子的准备 早期胚胎发育 胚胎移植的生理学基础 胚胎移植的基本程序 胚胎分割 胚胎干细胞 ;.; * 1、原理：细胞的全能性 2、过程： 离体的植物器官 组织或细胞 愈伤组织 胚状体 试管苗 脱分化 再分化 植株 无菌条件 植物组织培养条件： 离体、营养物质、植物激素、一定的温度、适合的PH、适时光照、无菌环境。 植物组织培养 ;.; * 杂种植株 融合的原生质体AB 再生出细胞壁 脱分化 愈伤组织 再分化 1、过程 植物细胞的融合 植物组织培养 植物细胞A 原生质体B 原生质体A 杂种细胞AB 去 壁 去 壁 人 工 诱 导 植物细胞B 植物体细胞杂交技术 ;.; * 2、概念 将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。 3、优势和未解决的问题 优势（与有性杂交方法比较） ：打破了不同种生物间的生殖隔离限制，大大扩展了可用于杂交的亲本组合范围。 未解决的问题：未能让杂种植物按照人们 的需要表现出亲代的优良。 植物体细胞杂交技术 ;.; * （一）动物细胞的培养 幼龄动物 取动物器官 和组织 剪碎组织 胰蛋白酶处理 细胞培养 单个细胞 动物细胞培养技术：是其他动物细胞工程技术的基础 原理：细胞增殖（有丝分裂） ;.; * 3、动物细胞培养过程： 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬浮液 胰蛋白酶 10代细胞 原代培养 50代细胞 传代培养 细胞株 无限传代 细胞系 单个细胞 加培养液 遗传物质未改变 遗传物质已改变 （分解细胞） ;.; * 2、培养条件： 无菌无毒环境、 充足营养、 适宜温度、PH 气体环境； 3、 应用 （1）生产有价值的蛋白质制品，（如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体、动物激素） （2）检测有毒物质 （3）用于生理、病理、药理等方面的研究 （一）动物细胞培养 ;.; * （二）细胞核移植技术和克隆动物 将动物的一个细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成为一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体（克隆动物） 分 类 胚胎细胞核移植： 体细胞核移植： 细胞分化程度低，恢复全能性容易 细胞分化程度高，恢复全能性不容易 1 、动物细胞核移植概念： ;.; * ;.; * 1、在畜牧业中可以加速家畜遗传改良的进程 2、保护濒危物种 3、医药卫生领域生产医用蛋白质及组织器官的移植 4、了解胚胎发育和衰老过程；追踪研究疾病的发展过程和治疗疾病 3、体细胞核移植技术的应用前景 （二）细胞核移植技术和克隆动物 ;.; * （三）动物细胞融合 1、概念： 指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 2、过程： 动物细胞A 动物细胞B 诱导，融合 杂交细胞 有丝分裂 （膜融合、质融合） （核融合） 注意：动物细胞的融合也需要把多个两种细胞放在一起，让它们随机融合后，再从中筛选杂交细胞 3、应用：成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。 特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体 ;.; * 1、原理：杂交瘤细胞双亲的遗传特性，即能迅速大量繁殖，又能分泌专一抗体。 2、过程 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 诱导融合 B-B细胞 B-瘤细胞 瘤-瘤细胞 选择培养 杂交瘤细胞（ B-瘤细胞） 克隆化培养 专一抗体检测 杂交瘤细胞 体外培养 小鼠腹腔内增殖 单克隆抗体 （四）单克隆抗体 单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高、可大量制备 ;.; * 3.应