总酚含量测定-多酚含量测定-操作流程图-实验图解-李熙灿-Xican Li.docVIP

PAGE PAGE 1 多酚含量测定-总酚含量测定(操作流程图) 2017.10 【测定方法与操作流程图】 【溶液配制】 (1)0.25mol/L Folin酚(福林酚)试剂的配制：取2mol/L Folin-Ciocalteu试剂1mL，加蒸馏水7mL，充分混合，得0.25mol/L的Folin-Ciocalteu试剂,共8mL。 (2)15%Na2CO3溶液的配制：取Na2CO3?10H2O溶3.0 (3)连苯三酚 本文使连苯三酚作为标准品.当然,也可以使用咖啡酸、槲皮素、儿茶素、芦丁等作为标准品，绘制标准曲线 本文使连苯三酚作为标准品.当然,也可以使用咖啡酸、槲皮素、儿茶素、芦丁等作为标准品，绘制标准曲线。 (4)样品液的的配制：精确称取待测样品10mg．用甲醇 也可以用无水乙醇、95乙醇、水，视样品的溶 也可以用无水乙醇、95乙醇、水，视样品的溶解性而度。 【连苯三酚标准曲线的绘制】 0.2mg/mL样品液加 样 量(x mL) 甲醇 (05-x) A760值 A760平均值 SD 0.000 0 0.50 0.03 0.038667 0.017442 0 0.50 0.023 0 0.50 0.063 0.004 0.01 0.49 0.15 0.166667 0.015861 0.01 0.49 0.162 0.01 0.49 0.188 0.008 0.02 0.48 0.29 0.294667 0.003682 0.02 0.48 0.299 0.02 0.48 0.295 0.02 0.05 0.45 0.749 0.729 0.016753 0.05 0.45 0.708 0.05 0.45 0.73 0.032 0.08 0.42 1.088 1.092 0.00432 0.08 0.42 1.09 0.08 0.42 1.098 0.04 0.1 0.4 1.393 1.394333 0.031857 0.1 0.4 1.356 0.1 0.4 1.434 0.048 0.12 0.38 1.747 1.636 0.092307 0.12 0.38 1.521 0.12 0.38 1.64 0.06 0.15 0.35 1.983 1.927667 0.041516 0.15 0.35 1.883 0.15 0.35 1.917 图 Folin酚法测定多酚含量的标准曲线（以连苯三酚为例,平行测三次） （以连苯三酚为例，A = 32.16733*C + 0.06012, R=0.998，线性范围：连苯三酚0.00-0.06mg/mL，A值在0.039-1.928之间）。 【多酚含量的计算】 依上述公式A = 32.16733*C + 0.06012, 由A值即可求得浓度C值。 【说明】 (1)不同的分光光度计所测得的A值可能不一样，所以，同一次实验要用同一台分光光度计； (2)Folin-Ciocalteu试剂：可向试剂公司购买，一般其浓度为2 mol/L。也可以自配方法如下：将100g钨酸钠(Na2WO4 ·2H2O), 25g钼酸钠( Na2MoO4·2H2O) ,700 mL蒸馏水，50 mL 85%磷酸及100 mL浓盐酸装入带回流装置的2000mL圆底烧瓶中，充分混合，文火缓慢回流10h,在加入150g硫酸锂(Li2SO4),50 mL蒸馏水及数滴液溴，然后将烧瓶内溶液开口煮15min，以驱除过量的溴，冷至室温后用容量瓶定容至1000mL，过滤。滤液呈微绿色。置于冰箱中长期冷藏备用临用时稀释。（钨酸钠、钼酸钠、硫酸锂，都比较贵) 【文献】Xican Li, Qiuping Hu, Shuxia Jiang, Fei Li, Jian Lin, Lu Han,Yuling Hong, Wenbiao Lu, Yaoxiang Gao, Dongfeng Chen. Flos Chrysanthemi Indici Protects against Hydroxyl-induced Damages to DNA and MSCs via Antioxidant Mechanism: A Chemistry Study. Journal of Saudi Chemical Society, 2015, 19, 454-460