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玉米组织培养;主要内容:; 植物组织培养的意义;玉米组织培养的目的;玉米组织培养的研究回顾;玉米组织培养的研究现状;玉米组织培养的主要方法(简介);2、 玉米茎尖和根尖离体培养
玉米植株的根尖和茎尖分生组织具有良好的分化性能。玉米茎尖和根尖离体培养有利于促进完整玉米植株的生长,并且在取材上不受季节限制。
;3、玉米幼胚的组织培养
玉米幼胚属于二倍体, 且分生能力较强。幼胚是最易诱导, 也是目前最常用的外植体, 但幼胚取材的时间受到严格的季节限制。
;玉米幼胚组织培养的全过程;2、外体消毒及挑幼胚
75%酒精擦玉米外层叶片 至超净工作台,用75%酒精擦玉米外层叶片,剥一层擦一层至完 用刀去掉1/3玉米籽粒 挑幼胚 接种到准备好的诱导培养基上(暗培养)
;3、继代
准备继代培养基(N6+水解酪蛋白0.1g/L+L-脯氨酸0.69g/L+甘露醇20g/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L+2,4-D1mg/ml)
诱导两次后,转入继代培养基每7天继代一次,直至出透明、黄色、坚硬的愈伤组织,可用于转化(一般继代三次)
;4、转化
浸染培养(22--25℃,暗培养3天)
恢复培养(暗培养3天)
筛选培养
分化培养
生根培养
壮苗
;5、移栽及管理
移栽前,应对移栽用的基质进行灭菌。
移栽前,可将培养物不开口移到自然 光照下锻炼2-3天,然后再开口练苗1-2天,以适应将来自然湿度的条件。
玉米组培苗移栽时首先应把根部的培养基清洗干净,以免受细菌或真菌污染而影响幼苗生长。
移栽
;玉米茎尖组织培养的全过程;1、玉米种子消毒
在500ml三角瓶中装入200—300粒玉米种子
用75%酒精清洗8min
0.1%升汞5min
无菌水洗2遍
加入无菌水静置8h
0.1%升汞8min
无菌水洗5遍
装入钣盒
28℃暗培养3天
;2、接种
取出培养三天后的种子,接种到MS固体培养基中,根向下伸入培养基中,芽向上,芽萌发得不太好的继续放进饭盒中再培养。
接种到MS固体培养基中的芽放回28℃暗培养3-4天。
;3、玉米茎尖转化
取出MS固体培养基中的芽放在无菌滤纸上
切根;镊子夹胚轴,在茎尖处用刀尖切半边。
;在茎尖生长点划一小口。
;转化后,接种于MS培养基中,进行暗培养。
;3、移栽及其管理
培养3—5天后,将其移栽至至花盆中,其 中注意事项与前面的相同。后期的管理也于前者相近。
;谢 谢
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