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中药学与分子生物学 中药学与分子生物学 ? 本文探讨了近年来分子生物学技术 在中药研究领域中的应用,阐明把分 子生物学的新技术引入到中药研究中。 不仅为探讨中药的作用机理和研制新 药提供了一种新的研究工具和方法, 而且还将启迪新的思想和发展新的诊 疗技术,必将对中药学的变革和进步 起到巨大的推动作用。 具体可分为以下几个方面: ? 一、 应用分子生物学技术进行中药 优良品种的培育 ? 二、利用分子生物学技术探讨中药作用机理 ? 三、利用基因芯片技术筛选和开发新药 应用分子生物学技术进行中药优良品种的培育 ? 运用分子生物学中基因工程技术和细胞 工程技术,一方面可对药用植物品种实 施遗传改造、构建新型的抗逆力强的优 良品种,以加强中药高产、优质、多抗 新品种的选育;另一方面,用基因工程 技术培育出的抗病毒、抗虫害的新型中 药能减少农药施用,杜绝农药和重金属 污染,保证中药的安全性。 利用基因工程技术对植物改造的一般步骤 转基因植株 的鉴定 重组 DNA 的 制备 目的基因的 获取 载体系统及 其改造 植物的遗传 转化 具体可分为以下几个方面: 一、应用分子生物学技术进行中药优良品种的培 育 二、利用分子生物学技术探讨中药 作用机理 三、利用基因芯片技术筛选和开发新药 1 、 张幸国等探讨复方丹参注射液对血管内皮细胞基 因表达谱的影响 ? 培养人脐静脉内皮细胞;复方丹参注射液作用 细胞 18h ,以正常培养的细胞作对照,用心血管 疾病及细胞因子相关的基因芯片研究复方丹参注 射液对培养的人脐静脉内皮细胞基因表达谱的影 响,并用 RT-PCR 方法对表达上调与表达下调的基 因进行了扩增和电泳检测。基因芯片分析筛选出 复方丹参对内皮细胞的影响基因 9 个,其中上调 基因 3 个,下调基因 6 个,包括一些与免疫、血管 舒缩、细胞黏附及抗氧化的相关基因;对差异表 达的基因用 RT-PCR 扩增及电泳检测结果与基因芯 片结果一致,证实了基因芯片的检测结果复方丹 参可通过多种途径在基因水平调节内皮细胞的功 能 2 、李孟秋等研究雷公藤红素对小鼠的免疫抑制 作用及对细胞因子 IL-6MRNA 表达的影响 ? 采用碳粒廓清、迟发型变态反应、血清溶血素测 定和 T 淋巴细胞转化实验,观察雷公藤红素对小 鼠免疫功能的影响;运用 RT-PCR 半定量法研究雷 公藤红素对小鼠肝脏 IL-6mRNA 表达影响。雷公藤 红素能抑制小鼠血清溶血素水平 (400ug/kg) ,且 与剂量呈依赖关系;小鼠耳廓肿胀度研究表明, 雷公藤红素能使迟发型变态反应程度减轻 (400ug/kg) ;雷公藤红素剂量在 0.25ug/mL 时,可 以明显抑制植物血凝素 (PHA) 诱导的细胞增殖;雷 公藤红素 800ug/kg 能对抗 CCl4 引起的急性肝损伤 小鼠肝脏 IL-6mRNA 含量的升高。雷公藤红素在一 定程度上能抑制小鼠的免疫功能,能抑制炎症细 胞因子 IL-6 基因的过度表达。 3 、郑欣岳等观察了四物汤对小鼠脾淋巴细胞产 生 IL-6 的影响 ? 郑欣岳等观察了四物汤对小鼠脾淋巴细胞产生 IL-6 的影响,结果发现四物汤可显著提高 IL- 6mRNA 的表达水平,从而使 IL-6 的分泌量增加, 推测这是四物汤增强机体免疫和补血作用的机 制之一。 4 、史大卓等研究了防治细胞缺氧缺糖的主要机 制 ? 史大卓等认为川芎嗪注射液可促进缺氧缺糖心 肌细胞蛋白质 RNA 的合成,同时诱导 NOSmRNA 的 表达,认为川芎嗪增强 NOS 基因的表达是其防治 心肌细胞缺氧缺糖的主要机制。中药的抗癌机制 可能是通过调控 c-fos 和 P53 、 PC1-2 、 c-myc 等基 因的表达来诱导肿瘤细胞凋亡。绿茶抗氧化剂复 合儿茶素对促癌剂 12- 氧 -4- 烷佛波醇 -13- 乙酸酯 (TPA) 的影响有明显拮抗作用,即复合儿茶素能抑 制促癌剂引起的 c-fos 、 c-myc 的基因表达,而对 抑癌基因 Rb 表达有调控作用。陈记藩等认为通痹 灵可使 RA 大鼠滑膜细胞 TNF-amRNA 表达水平降低, 提示通痹灵治疗 RA 作用机理之一是通过抑制滑膜 细胞异常表达的 TNF-amRNA ,从而下调 TNF-a 的 产生。 4 、史大卓等研究了防治细胞缺氧缺糖的主要机 制 ? 史大卓等认为川芎嗪注射液可促进缺氧缺糖心 肌细胞蛋白质 RNA 的合成,同时诱导 NOSmRNA 的 表达,认为川芎嗪增强 NOS 基因的表达是其防治 心肌细胞缺氧缺糖的主要机制。中药的抗癌机制 可能是通过调控 c-fos 和 P53 、 PC1-2 、 c-myc 等基 因的表达来诱导肿瘤细胞凋亡。绿茶抗氧化剂复 合儿茶素对促癌剂 12- 氧 -4- 烷佛波醇 -13- 乙酸酯 (
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