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赖氨酸发酵种子扩大培养 种子培养 斜面种子的制备:要求种子纯,没有杂菌和噬菌体污染。 培养基:蛋白胨1%、牛肉膏1%、氯化钠0.5%、葡萄糖0.5%、琼脂2%。组成pH7.0-7.2琼脂培养基。灭菌后30℃保温24h检查无菌后放冰箱备用。 培养条件:30-32℃培养18-24h。 一级种子培养: 培养基:葡萄糖2%、玉米浆1-2%、尿素0.1%、磷酸氢二钾0.1%、硫酸镁0.04%、硫酸氨0.4%。pH7.0-7.2。 培养条件:30-32℃,培养15-16h。 二级种子培养:用种子罐培养,用水解糖代替葡萄糖。 培养条件:温度30-32℃;通风量1:0.2(V/V),搅拌200r/min。 时间8-11h。 斜面菌种 一级种子培养 二级种子培养 发酵罐 赖氨酸发酵的工艺条件 培养基: 1、碳源: 葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖(来源于大米、玉米合薯类);糖蜜(甘蔗、甜菜) 2、氮源: 无机氮源: (1)尿素 (2)液氮 (3)碳酸氢铵; 有机氮源:玉米浆、麸皮水 解液、豆饼水解液和糖蜜等。 作用:合成菌体、赖氨酸、调节pH 目前,工业生产采用大豆饼粉。花生饼粉和毛发的水解液为有机氮源,用量2-5%。 温度:前期32℃,中后期34℃ pH: 6.5~7.5,最适6.5~7.0。 pH控制:流加尿素或氨水。 种龄:对数生长期种子 接种量: 二级种子接种量2%,种龄一般为8~12h;三级种子种量10%,种龄6~8h。 供氧:充足。 生物素:(1)赖氨酸生产菌为生物素缺陷型,发酵培养基中需要生物素作 为生长因子。 (2)过量生物素可促使细胞内合成的谷氨酸对谷氨酸脱氢酶的反馈抑制作用增强,抑制谷氨酸大量生成,使代谢流通向合成天冬氨酸方向进行,增加其含量,提高赖氨酸产量。 (3)要充足,20~30?g/L以上 维生素B1 :有促进作用 醋酸:加入醋酸比单独采用糖质原料Lys产量高 硫酸铵:适当增加,4%~4.5% 流加糖和其它生长因子 知识拓展: 思考: 采取何种方法可以改善来氨酸的生产菌种来提高谷氨酸产量?
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