免疫学检验 化学发光免疫检验技术 22 第二十一章 化学发光免疫技术.pptVIP

化学发光酶免疫分析 三、技术要点 抗原抗体结合反应 结合物与游离物的分离 (磁颗粒分离法 、微粒子捕获法 、包被聚苯乙烯反应珠或孔分离法 ) 酶促发光反应 电化学发光免疫分析 04 电化学发光免疫分析 一、 检测原理 电化学发光免疫分析（ECLIA）是以电化学发光剂三联吡啶钌标记抗体(抗原)，通过抗原抗体反应和磁珠分离技术，根据三联吡啶钌在电极上发出的光强度对待测的抗原或抗体进行定量分析，它包括电化学和化学发光两个过程。 电化学发光免疫分析 电化学发光免疫分析双抗体夹心法原理示意图 抗体包被的磁珠 抗原 RU(bpy)32+标记抗体 引入TPA缓冲液 TPA电子供体 RU(bpy)32+发光 电化学发光免疫分析 电化学发光免疫测定示意图 抗原抗体结合的磁性微粒 光电倍增管 电极 电极 流动测量池 液体流向 磁铁 激发区 工作电极 未结合标记抗体 电化学发光免疫分析 二、方法类型 分离方法：常用磁颗粒分离技术。 免疫学反应模式：其反应模式同发光免疫分析，主要有双抗体夹心法、双抗原夹心法和固相抗原竞争法三种主要模式，所不同只是相应抗原或抗体上标记的是三联吡啶钌。 1 2 电化学发光免疫分析 三、技术要点 抗原抗体反应 结合物与游离物的分离 (磁颗粒分离技术) 电化学发光过程 化学发光免疫技术的临床应用 05 化学发光免疫技术的临床应用 一、化学发光免疫技术的特点 敏感度高，甚至超过RIA； 精密度和准确性均可与RIA相比； 试剂稳定，无毒害； 测定耗时短； 测定项目多； 已发展成自动化测定系统。 1 2 3 4 5 6 化学发光免疫技术的临床应用 二、 化学发光免疫技术常见的检测项目 甲状腺激素：T3、T4、hTSH、FT4、FT3、抗TPO、甲状腺球蛋白、抗甲状腺球蛋白抗体等。 生殖激素：β-HCG、催乳素、促卵泡激素、促黄体激素、孕酮、雌二醇、非结合雌三醇、甲胎蛋白、睾丸酮、硫酸脱氢异雄酮。 肾上腺/垂体激素：皮质醇、尿皮质醇、人生长激素、甲状旁腺素、促肾上腺皮质激素。 1 2 3 化学发光免疫技术的临床应用 二、 化学发光免疫技术常见的检测项目 贫血因子：维生素B12、叶酸、红细胞叶酸、铁蛋白等。 肿瘤标记物：AFP、CEA、PSA、游离PSA、CAl9-9、CAl25、CAl5-3等。 感染性疾病：衣原体抗原、尿衣原体抗原、衣原体抗原确认、弓形体IgG抗体、弓形体IgM抗体、风疹病毒IgG抗体、风疹病毒IgM抗体、巨细胞病毒IgG抗体、巨细胞病毒IgM抗体等。 4 5 6 化学发光免疫技术的临床应用 二、 化学发光免疫技术常见的检测项目 糖尿病：胰岛素、C肽等。 心血管系统：肌酸激酶MB同工酶、地高辛、肌红蛋白、心肌肌钙蛋白-I等。 病毒标记物：HIVl/2Ab、HBsAg、HBsAg确认、HBsAb、HCVAb、HAV、IgM、HAVAb、HBcAb、HBclgM、HBeAg、HBeAb等。 7 8 9 化学发光免疫技术的临床应用 二、 化学发光免疫技术常见的检测项目 骨代谢：骨胶原酶、脱氧吡啶啉等。 过敏性疾病：总IgE、特异性IgE等。 治疗药物监测：茶碱、地高辛、环孢素、巴比妥等。 10 11 12 小结 Sum up 化学发光是吸收了化学反应过程中所产生的化学能使分子激发而发光。化学发光免疫分析是将化学发光与免疫反应相结合，用于检测微量抗原或抗体的标记免疫分析技术，分为直接化学发光免疫分析，化学发光酶免疫分析和电化学发光免疫分析。 感谢观看！ Thank！ 第二十一章化学发光免疫技术 本章要点 化学发光剂的概念及常用的化学发光剂。 1 化学发光免疫分析的基本原理及其技术类型。 2 化学发光酶免疫分析基本原理及其分离技术。 3 电化学发光免疫分析基本原理。 4 化学发光免疫技术的临床应用。 5 CONTENTS 目 录 发光基本知识 化学发光免疫分析 化学发光酶免疫分析 电化学发光免疫分析 化学发光免疫技术的临床应用 01 02 03 04 05 前言 化学发光免疫技术是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的抗原抗体反应技术相结合，用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、维生素和药物等的检测分析技术。该技术具有特异性高、灵敏度高、分离简便、 快速、试剂无毒、安全稳定、可自动化分析等特点，在免疫学检验中应用广泛。 前言 标记免疫技术 发光基本知识 01 发光基本知识 发光是指分子或原子中的电子吸收能量后，由低能级的基态跃迁到高能级的激发态，然后再返回到基态，释放出的能量表现为光的发射。根据形成激发态的激发能不同可将发光分为光照发光、生物发光和化学发光。 一、发光 发光基本知识 （一） 光照发光（photoluminescence） 发光剂（荧光素）经短波长入射光照射后进入激发态，当