医学免疫学教学资料免疫诊断与免疫治疗.pptxVIP

免疫诊断Immunodiagnosis p229-240免疫诊断(Immune diagnosis)概念 利用免疫学原理进行临床疾病的诊断或辅助诊断一、抗原或抗体的检测（一）、抗原抗体反应的特点 抗原抗体反应的特异性 抗原抗体反应的可见性利用已知抗体检测病人的未知抗原，如HBVsAg利用已知抗原检测病人的抗体，如抗HIV抗体、抗核抗体等YYYYYYY1041061010Keq =AvidityAffinityAvidity抗原抗体反应的影响因素：亲和力（affinity)亲合力 (avidity）抗原抗体反应的影响因素：抗原抗体比例合适温度酸碱度电解质（二）、检测抗原或抗体的方法1.凝集反应（agglutination)：颗粒性抗原与相应抗体结合形成凝集团块直接凝集反应：颗粒性抗原+相应抗体间接凝集反应：可溶性抗原+颗粒载体+相应抗体2.沉淀反应(precipitation)：可溶性抗原与相应抗体结合出现沉淀物单向免疫扩散：可用于检测血清中Ig的含量双向免疫扩散：抗原抗体的定性分析免疫电泳：常用于血清蛋白种类分析免疫比浊：Ab in gelAgAgAgAgDiameter2Ag Concentration单向免疫扩散双向免疫扩散AgAb免 疫 电 泳+-Ag4. 用标记的抗原或抗体进行的抗原抗体反应免疫荧光法：荧光素与抗体连接 荧光抗体 直接免疫荧光：荧光素标记的抗体直接作标本染色 间接免疫荧光：一抗与标本中的抗原结合，再用荧 光素标记的二抗染色FluorochromeLabeled AbAgTissue Section直接免疫荧光FluorochromeLabeled Anti-IgUnlabeledAbAgTissue Section间接免疫荧光 酶免疫测定：酶标记抗体进行的抗原抗体反应 酶联免疫吸附试验(ELISA)：将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使抗原抗体反应在固相表面进行。它将抗原抗体反应的特异性与酶的高效催化作用相结合，通过酶作用于底物后显色来判定结果。双抗体夹心法 检测待测抗原间接法 检测待测抗体BAS-ELISA （生物素-亲和素系统-ELISA）酶联免疫斑点试验(ELISPOT)免疫组化技术二、免疫细胞的测定分析免疫细胞的数量和功能，评价病人的免疫功能包括CD分子测定、淋巴细胞转化、吞噬实验、细胞毒实验等（一）、淋巴细胞的分离与类型鉴定分离方法：密度梯度离心 单个核细胞磁珠分离：抗体与磁珠交联免疫吸附分离法：将已知抗体包被培养皿，加入淋巴细胞悬液荧光激活细胞分选仪分离法（FACS）抗原肽-MHC分子四聚体技术磁珠分离法流式细胞分选仪（FACS）Two Parameter HistogramGreen Fluorescence IntensityRed Fluorescence Intensity流 式 细 胞 仪Unstained cellsNumber of CellsGreen Fluorescence IntensityGreen Fluorescence Intensity（二）、免疫细胞功能测定：T细胞功能测定B细胞功能测定吞噬细胞功能测定T细胞功能测定T细胞增殖试验细胞毒试验细胞因子检测皮肤试验3H-TdR 掺入法： 氚标记的胸腺嘧啶核苷2. MTT法 3-（4，5-二甲基-2-噻唑）-2， 5-二苯基溴化四唑淋巴细胞转化，镜下观察凋亡细胞检测法：细胞形态：琼脂糖电泳FACSTUNEL细胞毒实验：细胞形态：台盼蓝染色51Cr的释放LDH释放细胞因子的检测生物活性检测法CTLL 细胞株—— IL-2 依赖免疫学检测：ELISA ELISPOTB细胞功能测定Ig定量：单向琼脂扩散、免疫比浊法、ELISAB细胞增殖试验抗体形成细胞测定：溶血空斑实验 ELISPOT吞噬细胞功能测定趋化功能测定（Boyden 小室）吞噬功能测定（硝基蓝四氮唑 NBT、荧光标记的生物颗粒）三、免疫学检测方法的应用疾病的诊断： 感染性疾病 超敏反应性疾病 自身免疫病 免疫缺陷病 肿瘤免疫学监测：第二十三章 免疫学防治Immunoprophylaxis and immunotherapyp241-251 一、免疫预防自然免疫：机体感染病原体后建立的特异性免疫，包括胎儿或新生儿经胎盘或乳汁从母体获得抗体。疫苗（vaccine）：一些能够诱导机体产生特异性免疫的人工主动免疫制剂如细菌性制剂、病毒性制剂以及类毒素等统称为疫苗。人工主动免疫: 用疫苗接种机体使之产生特异性免 疫,从而预防感染的措施。人工被动免疫：给人体注射含特异性抗体的免疫血清或细胞因子等制剂，以治疗或紧急预防感染的措施。疫苗的基本要求: 安全 有效 实用 疫苗的种类灭活疫苗：狂犬病、伤寒、流感疫苗减毒