免疫学检测技术及的应用概述.pptVIP

免疫学检测技术及应用 g昌龙 免疫学教研蜜  免疫学检测技术应用: 1.疾病的诊断、治疗效果评价及发病 机理探讨: 如ε感染性疾病、免疫缺陷病、超敏 反应、自身免疫病、免疫增殖病、移植排 斥反应、肿瘤等 2.免疫分子的定性、定量测定: 如:细胞因子、粘附分子、细胞受体、 补体、抗体等  3.抗原物质的定性、定量检测: 如:病原微生物及其代谢产物,组织细 胞、蛋白质等 4.免疫细胞的分离、鉴定及功能测定: 如:T细胞及其亚群等  抗原一抗体反应 抗原与相应抗体在体内或体外相遇可发生 特异性结合,呈现的某种反应现象。  抗原抗体反应有以下几个特点: 1.抗原与抗体结合是特异性结合 表位(抗原)—超变区(抗体) 2.抗原抗体结合是分子表面的非共价键结合 氢键、疏水键、静电引力和范德华力 Van der waa|‘ s force)、电子云力的合 力 抗原和抗体可解离,性质不变。  3.抗原抗体反应可分为两个阶段 (1)特异性结合阶段 此阶段需时短,仅需几秒到几分钟,无可见 反应出现 (2)可见反应阶段 需时较长,数分,数小时或数日出现可见现 象,表现为沉淀,凝集细胞溶解等 4.抗原和抗体结合是否呈现明显可见的反应现 象,与两者的分子比例密切相关  POLYCLONAL ANTISERUM Antiboxycxcess Equivalence Antigen-cxcess oine acess Ah MONOCLONAL ANTIBODY Antibody precipitated  抗原抗体反应的主要影响因素: 1.电解质 在中性或碱性条件下,抗原抗体均带负电 荷,适当浓度的电解质会使它们失去一部 分负电荷而互相结合,出现明显的沉淀或凝 集现象 温度: 37C 3.酸碱度: pH6-8  抗原抗体反应包括 沉淀反应 凝集反应 溶解反应 补体结合反应 中和反应 已知抗体——检测未知抗原; 已知抗原—检测未知抗体。  Sensitivity of vario imi Precipitation reaction in fluids 20-200 Precipitation reactions in gels Mancini radial immunodiffusion 10-50 Ouchterlony double immunodiffusion 20 Rocket electrophoresis Agglutination reactions Passive agglutination 0.006-0.06 Agglutination inhibition 0.006-0.06 Radioimmunoassay 0.0006-0.006 Enzyme-linked immunosorbent c00001-0.01 ELISA using chemiluminescence 00001-001 mrmunoHlugrescence 1.0 Flaw cytometry 0.6-0.006