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、原核生物与真核生物的基因结构
、原核生物基因结构
一非编码区→1←——编码区—1←非编码区
,启动子广1 ATGTGCACGTAGTTA铁止
A
TACACGTGCATCAAT.I.
编码区上游
编码蛋白质
编码区下游
调控遗传信息的表达
(调控程序)
(1)编码区和非编码区
能编码蛋白质的区段叫做编码区;
不能编码蛋白质的区段叫做非编码区,
在非编码区上有调控遗传信息表达的核苷酸序列
非编码区→1
编码区
非编码区
启动子
cce【止子
RNA聚合酵) AUGUGCACGUAGUUA
(2)启动子、RNA聚合酶、终止子
启动子:位于基因首端一段能与RNA聚合酶结合并能
起始mRNA合成的序列。没有启动子,基因就不能转录。
RNA聚合酶能够识别启动子上的结合位点并与其结合
的一种蛋白质
终止子:位于基因的尾端的一段特殊的DNA片断
它能阻碍RNA聚合酶的移动,并使其从DNA模板链
上脱离下来,使转录终止。
2、真核生物的基因结构
一非编码区→1
编码区
←非编码区
编码蛋白质
启动子
终止子
外显子
内含子
(能编码蛋白质)(不能编码蛋白质)
(1)外显子和内含子
外显子能编码蛋白质,内含子不能编码蛋白质。
(2)非编码区和非编码序列
非编码序列包括非编码区和编码区的内含子
非编码区
编码区
非编码废
编码区上游
编码区下游
启动子
终止子
与RNA聚合酶结合位点
原核细胞的基因结构
真核细
基因结构
非编码区
编码区
启动子
终止子
转录
nRNA前体
外显子
加工↓
成熟mRNA
内含子
翻译
肽
0▲◆。◆
①相同点:都是由能够编码蛋白质的编码区和具有调控作用的非编
码区构成。②不同点:原核细胞基因的编码区是连续的;真核细胞
的编码区是间隔的,不连续的。
二、基因工程的基本操作程序
阅读教材P8-12,回答下列相关问题:
1、基因工程的基本操作流程图:
生物材料
专录
限制窖
包扦
第二非
植物组织培养等
(一)目的基因的获取
生物材料→分离DNA6NA片段基因组文库①从基因文库
分离MRNA→cDNA、cDNA文库
中获取
②利用PcR技术扩增
③化学方法人工合成
1、从基因文库中直接获取:
(1)基因文库的概念:见P
(2)基因文库的分类:(按外源DNA片段的来源分类)
基因组DNA文库:含有一种生物的全部基因
部分基因文库:只包含了一种生物的部分基因,
如:cDNA文库
(3)建立基因文库的目的
在未知基因序列的情况下,便于寻找并获得所需的大量的目的基因。
(4)基因文库的构建方法:〔①直接分离法基因组文库
②反转录法-cDNA
基因文库的构建方法之一:
①直接分离法鸟枪法
原核生物的基因组文库
用喝制切成多村断
提取某种生物的全部DNA
用适当的限制酶切
定大小的DMA片段
将DNA片与载体连接
导入受体菌中储存
基因组文库
馨
基因文库的构建方法之二:
反转录法:一主要是真核生物的cDNA
原核细胞的基因:
真核细胞的基因
在细胞质内转
在细胞核内转录
mRNA
在细胞质中将mRNA
分离并加入反转录酶
DNA单链
合成第二条DNA链
CDNA
基因文库的构建方法
基因组文库:一般针对原核生物的基因,因为基因少
部分基因文库:一般针对真核生物的基因,如cDNA文库
文库类型
cDNA文库
基因组文库
文库大小
基因中启动子
基因中内含子
小无无
大有有
基因多少某种生物的部分基因某种生物的全部基因
物种之间的基
可以
部分基因可以
因交流
说明基因文库的组建过程就包含基因工程的基本操
作步骤。从基因文库中获取目的基因的优点是
操作简便,缺点是工作量大,具有一定的盲目
性.
基因组AJ含目的基
DNAl
的基因I
提取
构建文库」筛选国因的菌株分离
母
菌
cDNA|CJ含目的基
mRNAH cDNA
提取
构建文库」筛选因的菌株分离
目的基因Ⅲ
限制酶切割
分离MRM录DNA片段→基因组文库}①从基因文库
生物材料→分离DN
→cDNA、cDNA文库
中获取
②利用PcR技术扩增
③化学方法人工合成
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