分子生物学实验常用工具酶总结计划.docVIP

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  • 2020-09-18 发布于山东
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分子生物学实验常用工具酶总结计划.doc

分子生物学实验常用工具酶总 结 现代分子生物学实验手册 工具酶 基因工程:在人工可以控制条件下,将基因剪切或重新组合,再导入另一 生物体内,使这些基因在其中表达并遗传下去的一门技术。 核心:对基因进行人工切割、连接和重新组合,构建重组 DNA 。 工具酶:在基因工程的重组 DNA 过程中,所需要用到的酶的统称。 一、限制性内切酶( restriction endonuclease ) 主要功能:对外源性的双链 DNA 进行切割、水解,不允许外源性 DNA 存 在于细菌自身细胞内。 (这种酶能对在自身细胞内存在的 DNA 种类给予限制 ——限制性内切酶) 限制 -修饰系统:合成限制性内切酶的细胞,其自身的 DNA 不受酶的切割, 这是因为细菌细胞还会合成一种修饰酶,可以对自身 DNA 进行修饰,即改变 DNA 原来具有的可以被限制性内切酶识别的核酸顺序结构,从而不被限制性内 切酶识别及切割、水解。 保护自身遗传物质稳定的机制。 限制性内切酶:从原核生物中发现的,约 600 种,可识别 108 种不同的特 定 DNA 顺序。以内切方式水解核酸链中的磷酸二酯键,产生 DNA 片段的 5’端 为 P,3’端为 - OH 。 命名:获得该酶的细菌属名的第一个字母(大写) +该菌种名的前两个字母(小写 )+株系的字母(小写)或数字 +罗马数字(同一株菌种不同内切酶的编号) 例: 细菌属名

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