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显微镜的基本使用 2011-6-11 显微镜分类及应用 光学显微镜 定义:以可见光为照明光源的显微镜 。 常用的光学显微镜有双目体视显微镜、金相显微镜、偏光显微镜、紫外荧光显微镜等。 电子显微镜 定义一:按电子光学原理用电子束使样品成像的显微镜 ; 定义二:一类用电子束为光源,显示标本超微结构的显微镜。 电子显微镜按结构和用途可分为透射式电子显微镜、扫描式电子显微镜、反射式电子显微镜和发射式电子显微镜等。 光学显微镜分类 按使用目镜的数目可分为双目和单目显微镜; 按图像是否有立体感可分为立体视觉和非立体视觉显微镜; 按观察对像可分为生物和金相显微镜等; 按光学原理可分为偏光,相衬和微差干涉对比显微镜等; 按光源类型可分为普通光、荧光、红外光和激光显微镜等; 按接收器类型可分为目视、摄影和电视显微镜等。 普通光学双目生物显微镜结构图 普通光学显微镜的基本成像原理 光线 (反光镜) 聚光器 通光孔 镜检样品(透明) 物镜的透镜(第一次放大成倒立实像) 镜筒 目镜(再次放大成虚像) 眼。 江西凤凰XSP-15B双目数码显微镜参数 ¤总放大倍数:40X-1600X¤镜筒:推拉双目三通TV,45°倾斜,360°旋转瞳距55-75mm¤目镜:平场P6.3X,P10X,P16X?¤物镜:平场消色差物镜4X,10X,40X(S),100X(O,S)¤转换器:四孔转换器¤载物台:双层机械移动平台140mm×140mm,70mm×50mm¤调焦机构:粗微动同轴粗调: 25mm ,微调精度:0.002mm带有松紧调节及随机定位装置¤聚光镜:阿贝式聚光镜可升降,N.A=1.25带可变光栏,可装滤色片¤照 明:内置柯拉照明12V/20W卤素灯¤集光镜:具有光栏调节功能¤电 源:交流220V/60HZ 与普通显微镜对比 直接在镜座上安装光源,并有电流调节螺旋,用于调节光照强度。 将显微镜看到的实物图像通过数模转换,使其成像在计算机上,进而将图像以电子文档的形式保存。 显微镜的一般使用 连接电脑及显微镜电源,启动电脑。 打开显微镜光源。 低高倍镜观察。 油镜观察。 收镜。 低中高倍镜观察 将待观察的样品放在载物台上,用弹簧夹固定,有盖玻片的一面朝上。移动推进器,调节待检样品至通光孔的中心。 转动转换器,使低倍镜正对通光孔,将聚光器上的虹彩光圈开到最大,通过调节电流旋钮来调节光照的强弱。如果要使用双筒目镜,应在观察前先调整双筒距离,使两眼视场合并。 缓缓转动粗准焦螺旋,将物镜与装片的距离调至最近。注意不要压碎盖玻片。通过目镜观察,同时用粗准焦螺旋缓慢调节,直至物像出现,再用细准焦螺旋微调,同时调节光源亮度与虹彩光圈的大小,使物像达到最清晰的程度。并利用推进器把需要进一步放大观察的部分移至视野中央。 中高倍镜:转动转换器,选择较高倍数的物镜,用细准焦螺旋调节焦距,到 物像清晰为止。 油镜观察 油镜一般用于观察衣原体,细菌,细胞器等较细微的结构,油浸物镜的工作距离很短,一般在 0.2 mm 以内,因此使用油浸物镜时,调焦速度必须放慢,避免压碎玻片,并使物镜受损。 (1)在低倍镜下找到观察目标,中、高倍镜下逐步放大,将待观察部位置于视野中央。 (2)转动粗准焦螺旋,将镜筒上旋(或将载物台下降)约 2 cm,加一小滴香柏油于玻片的镜检部位上。 (3)将 粗准焦螺旋缓缓转回,同时注意从侧面观察,直至油镜浸入油滴,镜头几乎与标本接触。 (4)从目镜中观察,用细准焦螺旋微调,直至物象清晰。 (5)镜检结束后,将镜头旋离玻片,立即清洁镜头,用擦镜纸擦去镜头上的香柏油滴。 体视显微镜 普通光学显微镜的光源为平行光,因而形成的是二维平面影像;而体视显微镜采用双通道光路,双目镜筒中的左右两光束具有一定的夹角体视角(一般为 12o15o),因而能形成三维空间的立体图像。 体视显微镜与普通光学显微镜的使用方法相近,但更为便捷。二者的主要区别在于: 1. 体视显微镜的镜检对象可不必制作成装片。 2. 体视显微镜载物台直接固定在镜座上,并配有黑白双面板或玻璃 板,操作者可根据镜检的对象和要求加以选择。 3. 体视显微镜的成像是正立的,便于解剖操作。 4. 体视显微镜的物镜仅一只,其放大倍数可通过旋转调节螺旋连续调节 金相显微镜 金相显微镜是专门用于观察金属和矿物等不透明物体金相组织的显微镜。 这些不透明物体无法在普通的透射光显微镜中观察,故金相和普通显微镜的主要差别在于前者以反射光,而后者以透射光照明。 在金相显微镜中照明光束从物镜方向射到被观察物体表面,被物面反射后再返回物镜成像。这种反射照明方式也广泛用于集
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