旧结核菌素制造及检定规程.docxVIP

旧结核菌素制造及检定规程 本品系用结核菌的液体培养物，经杀菌后除去菌体，加温浓缩制成的粘性液体，含有结核菌的新陈代谢产物，对已受结核菌感染或曾接受卡介苗免疫的相体，能引起特异的变态反应。用以检查是否已受结核菌的感染及观察免疫反应。 1　菌种 1.1　由中国药品生物制品检定所分发或经同意。 1.2　制造旧结核菌素的菌种为人型结核菌。 1.3　菌种可冻干保存，亦可保存于骆（Lowenstein）氏培养基上，每3～6个月传代一次。 2　制造 2.1　启开菌种接种于骆氏培养基，置37℃培养2～3周，然后移种在苏通综合培养基或其他适宜培养基上，于27℃表面培育2～3周，再在甘油肉汤或苏通培养基上移种1～2代供大量接种之用。 2.2　接种 用接种环挑取一块生长良好的菌膜，轻轻移种于5%（ml/ml）甘油肉汤或其他适宜培养基的表面，菌膜应不下沉。 接种后37℃培育8～10周，要避免振动以免菌膜下沉。培育3周左右如培养瓶中菌膜未铺满表面，或培养期间有污染者应废弃。 2.3　杀菌 高压蒸汽121℃30分钟，或100℃流动蒸汽加热1小时。 2.4　杀菌后用无菌绒布或滤纸过滤除去菌体。 2.5　浓缩 滤液置蒸发皿中于75～80℃水浴上加温蒸发。应在通风柜内进行，并不时搅拌（亦可用其他方法）。浓缩至约为原量的1/10。 2.4　杀菌后用无菌绒布或滤纸过滤除去菌体。 2.5　浓缩 滤液置蒸发皿中于75～80