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免疫学检验
1.T细胞:T细胞是在胸腺中发育成熟的淋巴细胞。
2.B淋巴细胞:B淋巴细胞是在骨髓内发育成熟的细胞。
3.最常见的主要辅佐细胞有单核吞噬细胞和树突状细胞。
4.抗原的特性:免疫原性和免疫反应性。
5.影响抗原免疫性的因素
(1)抗原因素:1.异质性指抗原与机体成分结构的差异程度,是作为抗原的必要条件。2,抗原分子的理化性质,如分子量大小,化学组成和结构,通常环状分子蛋白质较直链分子蛋白质免疫原性强,还有分子构像与易接近性,以及物理状态。
(2)机体因素:(宿主因素)1.遗传因素2.年龄、性别与健康状态3.抗原剂量及进入机体的途径,进入机体途径以皮内注射免疫原性最佳,皮下注射次之,肌肉注射、腹腔注射、静脉注射再次,口服免疫原性最差。
6.抗原表位:又称抗原决定簇,指存在于抗原分子表面的,能与TCR/BCR或抗体特异性结合,决定抗原特异性的特殊化学基团。
7.不完全抗原:仅有免疫反应性而无免疫原性的物质,又称半抗原,多为一些简单的小分子物质、药物等。
8.根据抗原刺激B细胞产生抗体时是否需要T细胞辅助分类分为:胸腺依赖性抗原和胸腺非依赖性抗原。
9.超抗原:是指能直接非特异性激活某些T细胞亚型或B细胞亚型的物质。
超抗原可分为T细胞超抗原和B细胞超抗原,T细胞超抗原如金黄色葡萄球菌肠毒素A
E等;B细胞超抗原如金黄色葡萄球菌A蛋白和人类免疫缺陷病毒。
10.免疫球蛋白的生物学功能
免疫球蛋白V区的功能:识别并特异性结合抗原,在体内可直接发挥中和作用(中和病毒、毒素),以阻止病原入侵;但不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞,要借助C区的作用,才能清楚病原微生物或者导致病理损伤。
免疫球蛋白C区的功能:1.激活补体
2.与细胞Fc受体结合发挥多种生物学作用:①调理作用
②抗体依赖细胞介导的细胞毒作用ADCC③介导Ⅰ型超敏反应
3.穿过胎盘和粘膜
11.IgG为单体分子,是血清和细胞外液中含量最高的Ig,约占血清总Ig的75%-80%
IgM为五聚体,是血清中分子量最大的Ig,又称巨球蛋白。也是个体发育过程中最早合成和分泌的Ig,不能通过胎盘,若脐带血或新生儿血清中其水平升高提示有胎儿有宫内感染,体液免疫应答中,其水平升高提示有近期感染。天然的血型抗体为IgM;IgM也参与II、III型超敏反应。一般不能通过血管壁,主要存在于血液中,IgM缺乏易导致败血症,其激活补体和免疫调理作用较IgG强,在菌血症和败血症的抗感染中发挥重要作用。
IgE的临床意义:IgE主要由呼吸道和消化道黏膜固有层的浆细胞产生,对肥大细胞及嗜碱粒细胞具有高度亲和性,为亲细胞性抗体;其Fc段能与肥大细胞及嗜碱粒细胞上的高亲和力IgEFc受体结合。介导I型超敏反应。此外,IgE可能与机体抗寄生虫免疫有关。在特异性过敏反应和寄生虫早期感染患者血清中,特异性IgE水平可升高。
12.抗原抗体的结合力:(1)库伦引力;(2)范德华引力(引力最小);(3)氢键结合力;(4)疏水作用(提供的作用力最大)。
带现象:在等价带前后分别为抗体过剩或抗原过剩,形成的沉淀物质少或无,这种现象称为带现象。出现抗体过剩是为前带,出现抗原过剩时为后带。
意义:只有当抗原抗体比例合适时,才易出现可见反映。
13.影响抗原抗体反应的因素:
反应物自身因素
(1)抗原:抗原的理化性状、抗原表位的种类和数目都可影响抗原抗体反应的结果。如颗粒性抗原与相应抗体结合后形成凝集现象;可溶性抗原与相应抗体结合后形成沉淀现象;粗糙型细菌在生理盐水中易出现自凝等现象。
(2)抗体:①抗体的来源;②抗体的特异性和亲和力。
反应条件
电解质;(2)PH:抗原抗体反应一般以6~8为宜,过高或过低都会影响抗原抗体的理化性质,从而导致不发生发应或者出现非特异性凝集;(3)温度:最适为37℃;(4)抗原抗体比例:抗原抗体在比例最合适时才易出现可见反应。
14.凝胶层析又称凝胶排阻层析、分子筛层析等。它是以各种多孔凝胶为固定相,利用物质的相对分子量不同而达到分离的一种层析技术。
15.亲和层析是通过将具有亲和力的两个分子中一个固定在不溶性载体上,利用分子间亲和力的特异性和可逆性,对另一个分子进行分离纯化。纯化抗原先用盐析法,再用亲和层析法。
由于亲和吸附的特异性很高,亲和层析一次纯化即可得到很纯的物质。
16.电渗:在电场作用下液体对于固体支持物的相对移动。
产生原因:固体支持物为多孔物质,且带有可解离的化学基团,因此常吸附溶液中的正或负离子,使溶液相对带负电或正电。如通常滤纸表面可有一些羧基,琼脂可有一些硫酸基,而玻璃表面可有Si-OH基团等,这些基团电离后使支持介质表面带电,吸附一些带相反电荷的离子,在电场的作用下向电极方向移动,形成介质表面溶液
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