高效阴离子交换色谱_脉冲安培法测定支链淀粉糖链长分布.docx

支链淀粉糖链长分布伟1 ，丁卉1 ，王婕琛2 ，蔡秀玲2 ，施 支链淀粉糖链长分布 伟1 ，丁 卉1 ，王婕琛2 ，蔡秀玲2 ，施超欧1* 贺 (1． 华东理工大学 分析测试中心，上海 200237; 2． 中国科学院 上海生命科学 研究院植物生理生态研究所，上海 200032) 摘 要: 采用高效阴离子交换色谱 － 脉冲安培法，建立了不同作物中支链淀粉糖链长分布的分析方法。通过 异淀粉酶水解支链淀粉糖分枝点的 α-1，6 糖苷键，形成不同长度的葡萄糖链。比较了不同色谱柱和不同色 谱条件对支链淀粉糖链长分布测定结果的影响，优化了测定方法。以水、0. 1 mol / L NaOH 和 1 mol / L NaAc + 0. 1 mol / L NaOH 溶液为淋洗液进行梯度淋洗，通过 CarboPac PA 20 阴离子交换柱分离，实现了对聚合度 (DP)大于 80 的支链淀粉糖葡萄糖链的测定。分别选取玉米、木薯、马铃薯与水稻的淀粉进行支链淀粉糖链 长分布的研究，并用于其分子构型的判断。实验结果表明该方法简便、检测范围广、重现性良好，连续 5 次 进样，在聚合度小于 65 时，各峰面积的相对标准偏差小于 5% ，可为进一步的淀粉糖理化特性研究和品种改 良提供有效的实验依据。 关键词: 链长分布; 支链淀粉; 离子色谱; 安培检测 中图分类号: O657. 75; TS236. 3 文献标识码: A 文章编号: 1004 － 4957(2012)10 － 1242 － 06 doi: 10. 3969 / j. issn. 1004 － 4957. 2012. 10. 005 Determination of Chain-length Distribution of Amylopectin by High Performance Ion Exchange Chromatography with Pulsed Amperometric Detection HE Wei1 ，DING Hui1 ，WANG Jie-chen2 ，CAI Xiu-ling2 ，SHI Chao-ou1* (1． Analysis and Test Center，East China University of Science and Technology，Shanghai 200237，China; 2． Institute of Plant Physiology ＆ Ecology，Shanghai Institutes for Biological Sciences， Chinese Academy of Sciences，Shanghai 200032，China) Abstract: A high performance ion exchange chromatographic method coupled with pulsed amperomet- ric detection was established for the analysis of amylopectin chain-length distribution． The amylopec- tin was hydrolysised into unit chain under the function of isoamylase which can broke the α-1，6 chain of glucan． The determination method was optimized by comparing different chromatographic col- umns and elution conditions． Water，100 mmol / L NaOH and 1 mol / L NaAc + 100 mmol / L NaOH a- queous solution were used as mobile phase，and the analysis of degree of polymerization (DP) more than 80 could be achieved by using CarboPac PA20 anion exchange column． Maize，cassava，potato and rice starch were selected as the example for the determination of chain-length distribution，which could be used to judge their molecular