优化HPLC及使用的注意事项精品.ppt

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HPLC维护 的晋放型结构 的绿色毛细管 瓶头篌块,FTFE娃 四元泵 FF区宽径,再切均 自功样 与照= 沮箱一色讲忤 控洲器-液 e9C17138,宽 1.在线脱气机 2.四元/二元/单元泵 3.自动进样器 4.二极管阵列检测器 5.可变波长紫外检测 器 在线脱气机在线脱气机 真空经气1 状原爸的腰头(以-35构 在线脱气机 总览(只表示啁个溶剂通道中的一个) 传盛墨控制电路 工作原理 四个管状 Moms 真空脱气机由一个四通道(有四个管状塑料膜)真空箱和一个真空泵构成。打 开真空脱气机的电源开关后,控制电路即开启真空泵,真冬泵运行使真空箱内 生部分真空。真空度由压力传感器测定。根据传感髒信号,真空脱气机通过 行或关闭真空泵来维持真空度 剂瓶中的溶剂在LC泵的抽动下流过真空精内的特殊管状塑料膜。当溶剂经 过真空管时,溶剂中溶解的气体将渗过塑料膜进入真空箱。到达真空脱气机出 口时,溶剂几乎巳被完全脱气而不含有任何气体 在线脱气机 何时需要使用在线脱气机 如果在低UV波长段、用最高的灵敏度进行检测时, 如果要求使用最佳的进样精度,或 要求保留时间重现性很高时(必须在流量低于0.5 ml/min时 如果样品和检测对流动相中的溶解氧敏感时(降解)。 通常,如果流动相中的溶解对分析有负面影响,超过用户可接受的程度时要 进行脱气,溶解气体造成的负面影响有 由于泵的运行不稳定而出现流动不稳定,这会造成压力的波动(在恒流和 流动相组分恒定时压力不稳定),或造成色谱峰保留时间和峰面积的标准 偏差高,特别是在低流速下尤为显碧 在检测番上出现基线噪音,这对折光指数的变化特别敏感(如在最高灵敏 度时的R检测器或在最高灵敏度时的低波段UV检测器) 样品降解 由于有溶解氧而使荧光淬灭 由于有溶解氧而使电化学检测器基线漂移,特别是在还原模式下尤为显 著 溶剂 用棕色玻璃瓶装水溶液,可以避免藻类的生长 过滤溶剂以免其中微粒永久性阻塞毛细管 避免使用下述可腐蚀钢铁的溶剂 碱金属卤化物及其酸溶液(如:碘化锂、氯化钾等) 高浓度无机酸,如硝酸、硫酸. 可能含有过氧化物的色谱纯醚(如THF、二氧六环、 二丙基乙醚)。这些在使用前必须用千燥氧化铝过滤 除去过氧化物 含强络合剂的溶液(如EDTA,乙二胺四乙酸) 四氯化碳与2-异丙醇或四氢呋喃的混合液。 3150-0577 日常维护,故障诊断 防止堵塞溶剂过滤器及真空腔 污染的溶剂或溶剂瓶里的藻类生长将会缩短溶剂过滤器的使用寿 命,并且影响泵的运行。这在水溶剂或磷酸盐缓冲液(pl4至7)中尤 其如此。下列建议将会延长溶剂过滤器的使用寿命并维持泵的运行。 使用灭过菌的溶剂瓶来减缓藻类生长 使用新鲜配制的流动相,特别是水溶剂或盐缓冲液(建议不 超过两天) 如果应用许可,在溶剂中加人0.0001-0.001M的叠氮化钠 避免溶剂瓶暴露在直射阳光下 用氩气置换流动相上层的空气。 长期不用时用水清洗水溶液通道并置换为甲醇 8 日常维护,故障诊断 检查溶剂过滤器 一拧开脱气机出口或比例阀入口管线,并使液面高于出口30cm;此时溶剂会因 为重力流出,脱气机或溶剂过滤头堵塞时,溶剂会流出不畅或不流出。 一查看过滤器是否变色 临时取下过滤器,检查柱前压力是否正常 渣洁溶剂过滤羅 将堵塞的溶剂过滤器从瓶头组件中拿下。先用水冲洗残留之溶剂,然后将 过滤器放在装有浓硝酸(35%)的烧杯里浸一小时 用二次蒸馏水彻底冲洗过滤器。建议不使用超声波清洗机清洗。 将过滤器重新装好。 建议定期清洗溶剂过滤器及溶剂瓶,每三个月至少清洗一次。 2 注意:不要使用没有安装溶剂过滤器的系统.可能会严重堵塞系统 日常维护 Question? 1如何简单判断脱气机脱气是否正常? 打开 Purge阀,设定泵的流速2 ml/min,提起当 前所使用溶剂瓶内的溶剂过滤头,使之脱离液面 小段时间,此时溶剂传送管内会产生一小段气 泡,放下过滤头,让此段气泡通过脱气机,如果 脱气机正常,气泡应消失或缩小。 2如何简单判断脱气机腔体或溶剂过滤头是否堵 塞? 关闭泵,拧开脱气机出口或比例阀入口管线此 时溶剂会因为重力流出,脱气机或溶剂过滤头堵 塞时,溶剂会流出不畅或不流出

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