dnscl末端氨基测定.pptxVIP

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1、实验对象 2、实验目的 3、实验技术 4、实验意义;胰岛素N-末端氨基酸的测定 ;背景介绍 ;胰岛素原(Proinsulin)一级结构 ;胰岛素(Insulin)一级结构 ;N端分析方法;;Edman降解法;;DNS-Edman测序法;;实验原理;实验原理;层析技术的原理;层析技术分类;聚酰胺薄膜;聚酰胺薄膜层析的原理;;实验方法 ;;0.5ml标准氨基酸+ 0.5ml DNS-Cl丙酮溶液(摇匀、封口);在聚酰胺薄膜距边线1cm处,用铅笔标记3个点; 毛细管点样标准品3次,胰岛素样品3次,直径不超过2mm,每次点样都要电吹风冷风吹干; 放入层析缸展层剂中展层(时间大约6-10m’),完毕后电吹风冷风吹干。 ;在紫外灯360nm下检测实验结果,画出图谱,计算Rf值。 比较胰岛素的DNS-N末端氨基酸和标准DNS-氨基酸的层析图谱,从而确定蛋白质样品的N-末端氨基酸种类。;

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