芽孢染色法最新.pdfVIP

名 称 微生物检验作业规范 文件编号：W-PGB1-4205 5.20 芽孢染色法 5.20.1 Schaeffer-Fulton 氏染色法 5.20.1.1 试剂： 5.20.1.1.1 5%孔雀绿水溶液： 孔雀绿 5g 蒸馏水 100ml 5.20.1.1.2 番红水溶液： 番红 0.5g 蒸馏水 100ml 5.20.1.2 操作方法： 5.20.1.2.1 制片、染色 将涂片在火焰上固定，滴加孔雀石绿染液，用木夹夹住载玻片一端,在微火上加热至染料冒蒸汽 并开始计时,维持 5min，（注意:加热过程中要及时补充染液,切勿让涂片干涸）。 5.20.1.2.2 水洗: 待玻片冷却后，用缓流自来水冲洗，直至流出的水为无色。（注意：勿用瀑水对着菌膜冲洗，以 免细菌被水冲掉。） 5.20.1.2.3 复染: 用番红染液复染 2 分钟 5.20.1.2.4 水洗： 用缓流水洗后，吸干。 5.20.1.2.5 镜检： 干后用油镜观察。芽孢呈绿色，芽孢囊及营养体为红色。 5.20.2 改良的 Schaeffer-Fulton 氏染色法 生效日期 2009.08.01 页次 1/2 页序 A 名 称 微生物检验作业规范 文件编号：W-PGB1-4205 5.20.2.1 制备菌悬液： 加 1～2 滴水于小试管中，用接种环挑取 2～3 环菌苔于试管中，搅拌均匀，制成浓的菌悬液。 （所用菌种应掌握菌龄，以大部分细菌已形成芽孢囊为宜；取菌不宜太少） 5.20.2.2 染色: 加孔雀绿染液 2-3 滴于小试管中，并使其与菌液混合均匀，然后将试管置于沸水浴的烧杯中，加 热染色 15-20 分钟。 5.20.2.3 涂片固定 用接种环挑取试管底部菌液数环于洁净载玻片上，涂成薄膜，然后将涂片通过火焰 3 次温热固定。 5.20.2.4 脱色 水洗，直至流出的水无绿色为止 5.20.2.5 复染 用番红染液染色 2-3 分钟，倾去染液并用滤纸洗干残液(不水洗) 5.20.2.6 镜检 干燥后用油镜观察。芽孢呈绿色，芽孢囊及营养体为红色。 生效日期 2009.08.01 页次 2/2 页序 A