刘小龙-循环肿瘤DNActDNA检测策略与临床意义.ppt

N Engl J Med 2013; 368:1199-1209 ? 在 30 例转移性乳腺癌患 者接受系统性治疗的不 同时间点测定血液中的 ctDNA ， CA 15-3 ， CTC 细胞 的含量，比较三者 之间的敏感度。 Comparison of Circulating Tumor DNA, CA 15-3, and Circulating Tumor Cells as Blood- Based Biomarkers 灵敏度： 偱环肿瘤 DNA ： 85% CA 15-3 ： 59% 灵敏度： 偱环肿瘤 DNA ： 90% 偱环肿瘤细胞： 67% Comparison of Circulating Biomarkers to Monitor Tumor Dynamics and Predict Survival. ? 结论：相对于蛋白类诊断标志物 CA15-3 及血液中的偱环肿瘤细胞， ctDNA 在监测肿 瘤的动态发展中具有更高的灵敏度。 ? 血浆中 ctDNA 的含量与预后密切相关，含量越高，病人的 5 年生存率越低（ P<0.001 ）。 ? ctDNA 含量的增高及 CTC 数目的增加，病人的预后显著变差，而 CA15-3 没有预后判断功能。 ? 监测 ctDNA 的突变率 比监测 cfDNA 浓度， 对胃癌动态发展的监 控灵敏度更高。 ? 利用区域捕获测序技术检测乳腺癌原发瘤及肝脏转移瘤的基因突变情况，并 监控血液中 ctDNA 在治疗过程中的动态变化。 循环肿瘤 DNA(ctDNA) 检测策略及临床意义 刘小龙， 博士、研究员 福建医科大学孟超肝胆医院，中国科学院海西研究院转化医学研究中心 2015.06.12 ? 肿瘤诊疗的困境：早期诊断 困难，错过最佳治疗时机； 易复发转移，预后差；放化 疗易产生耐受；缺乏有效的 治疗靶点等。 ? 早诊早治，实时监控、靶向 用药及个体化诊疗是提高肿 瘤远期生存率、降低死亡率 的关键。 肿瘤诊断方法 ? 血清标志物：蛋白类（癌胚抗原，糖类抗原，甲胎蛋白 等），核酸类（ microRNA, LncRNA ） ? 影像学诊断 ( 超声， CT ， MRI ， PET ， PET-CT) ? 循环肿瘤细胞（ circulating tumor cell , CTC ） ? 循环肿瘤 DNA （ circulating tumor DNA ， ctDNA ） 循环肿瘤 DNA(ctDNA) ? 人体血液循环系统中不断流动的携带一 定特征 （包括突变，缺少，插入，重排， 拷贝数异常，甲基化等） 来自肿瘤基因 组的 DNA 片段； ? 来源： 1 、来自于坏死的肿瘤细胞； 2 、 来自于凋亡的肿瘤细胞； 3 、循环肿瘤细 胞； 4 、来自于肿瘤细胞分泌的外排体； ? 含量低，约占整个循环 DNA 的 1% ，甚至 只有 0.01% 。 ctDNA 发展简史 ? 1948 年首次发现人体血液中存在着循环 DNA ，癌症患者的循环肿瘤 DNA 则发现于 1977 年。 ? 1994 年发现这些 DNA 含有癌症的标志性突变，证明其来自于肿瘤。 ? 鉴于肿瘤 DNA 会流入血液，香港中文大学的卢煜明（ Dennis Lo ）教 授推测胎儿 DNA 应该也能进入血液。 1997 年证明孕妇血液中携带着男 性胎儿的 Y 染色体。该发现允许医生们在怀孕初期通过无创方式检测 胎儿的性别，甚至筛查唐氏综合症等发育疾病。这是产前诊断领域的 一次革命 。 Nature Reviews Cancer 11 , 426-437 (June 2011) | doi:10.1038/nrc3066 Cell-free nucleic acids as biomarkers in cancer patients ctDNA 发展简史 研究热点 0 20 40 60 80 100 120 近 10 年 ctDNA 相关发表文章数（ pubmed 数据库） NEJM ： 4 篇 PNAS ： 7 篇 JAMA ： 1 篇 Sci Transl Med ： 6 篇 Cancer research:12 篇 Clin Cancer Res:28 篇 ctDNA 优势 ? 无创、无损、实时、多次； ? 当不能获得肿瘤组织信息时，可以开展“液体活检”； ? 假阳性率低，灵敏度高，准确度高，可用于肿瘤的早期诊断； ? 能够对肿瘤的演化和适应性改变进行监控； ? 能够对肿瘤病人的治疗效