CNAS-GL41临床微生物检验程序验证指南.pdfVIP

导读 包括显微镜检查、分离培养及鉴定、药敏试验等在内的临床微生物的检验方法 （检 验程序） 如何验证？很多人对此非常困惑。 由 CNAS2016.5.30新鲜发布的 《临床 微生物检验程序验证指南》 犹如一盏明灯给大家指明了具体的方向。 虽然是针对 认可实验室制定的指南文件，其他实验室亦可参考。 部分内容节选 显微镜检查 4.3 显微镜检查 显微镜检查程序包括涂片制备、染色镜检和结果报告过程。实验室在开展各种类 型显微镜检查（如革兰染色、抗酸染色、墨汁染色等）前应对本实验室使用的检验程 序进行验证，并由经培训有涂片镜检能力的实验室人员操作。检查方法可包括手工染 片法和自动化染片法。所有样品及其盛放容器均应当作有传染性物质，并按照实验室 生物安全要求进行操作。 4.3.1 验证要求 显微镜检查程序的验证应包括能力验证 / 实验室间比对和实验室内人员比对（当多 名人员从事该项目时） 。如果没有可获得的能力验证或室间质评， 实验室应自行组织实验室 间比对 （宜与通过认可的实验室比对）。 若实验室同时开展手工染片法和自动化染片法，应 进行两种方法的实验室内部比对。 4.3.2 比对方案 4.3.2.1 样品数量 每项检查应使用至少 5 份样品进行验证，覆盖全部样品类型，无菌样品类型包含 阴性和阳性结果。实验室应优先使用已知结果的留样样品，当不可获取时可采用模拟 样品。 4.3.2.2 检验程序 按临床标本常规方式处理 , 由本岗位工作人员使用实验室检验程序进行涂片制备、 染色、镜检、判读。 4.3.2.3 结果报告 根据实验室程序文件规定进行结果报告，其中抗酸杆菌应根据“分级报告标准” 报告镜检结果。 4.3.3 可接受标准 每项检查的比对结果符合率≥ 80% 。 分离培养 4.4.1 血培养 血培养检验程序包括从病人血液采集、运送、 接收、 孵育及监测的全过程。目前临床实验室 广泛使用全自动血培养系统。 临床微生物实验室血培养系统性能验证的主要目的是评估系统 使用的培养基能否用于培养临床常见微生物 （包括酵母菌、厌氧菌、 苛养菌等） 以及仪器 （自 动化系统）能否及时检测出血液中的大部分病原菌。 血培养性能验证常用 留样验证 和血培养系统平行比对 两种方法。 血培养系统平行比对用于评 估验证系统和参比系统检出细菌能力的一致性， 但需要样本量大， 临床采样有难度。 留样验 证的优点则在于可评估其检测不常见病原菌的能力。 实验室可根据医院病人数量和地区、 病 种特征等具体情况和两种方法的特点选择其中一种适宜的验证方法，或两种方法同时应用。 4.4.1.1 留样验证 4.4.1.1.1 验证要求 验证应覆盖临床常见微生物 , 需氧成人 / 儿童血培养瓶验证菌株应包括需氧 / 兼性厌氧革兰阳 性菌、需氧 / 兼性厌氧革兰阴性菌、苛养菌 （如：流感嗜血杆菌、肺炎链球菌等）和真菌， 厌氧血培养瓶验证菌株应包括兼性厌氧革兰阳性菌、 兼性厌氧革兰阴性菌、 专性厌氧菌， 其 他特殊用途血培养瓶参照厂家要求选择合适类型菌株进行验证。 每种类型至少１株， 总体不 少于 15 株。应尽可能使用真实患者的临床分离菌株 （性能验证用临床留样菌株宜经质谱或 DNA 序列分析确认）。对于特殊、苛养菌可使用标 准菌株或质控菌株。 某些特殊菌株需要在培养瓶中加入无菌、 未使用抗生素的厂家推荐血液 标本，如不加可能不生长，如流感嗜血杆菌。 4.4.1.1.2 验证方案 模拟临床血流感染患者的细菌含量，用留样菌株进行一系列稀释，接种细菌的最 终浓度为 5-30CFU/ 瓶。若