血液学检验技术、教学服务模块 教学课件、课件、溶血性贫血 学习单元9：溶血性贫血.pptx

血液学检验;学习单元9：溶血性贫血;目录/Contents;检验技师考试大纲--骨髓项检查;溶血性贫血的诊断步骤;;由于某种原因使红细胞寿命缩短、破坏增加，超过骨髓造血代偿能力所致的一类贫血。;;;溶血性贫血的发病机制;红细胞;溶血性贫血的诊断方法;血管内溶血和血管外溶血的鉴别;部位;不同类型溶血性贫血试验选择;溶血性贫血的过筛试验;血浆游离血红蛋白测定;【应用评价】正常情况，血浆中血红蛋白大部分与结合珠蛋白结合，仅有微量游离血红蛋白。测定血浆游离血红蛋白可判断红细胞的破坏程度。;血清结合珠蛋白测定;【应用评价】正常情况下，血浆中的血红蛋白与结合珠蛋白结合形成复合物，在单核-巨噬细胞系统和肝内清除。溶血时血浆中的血红蛋白与Hp结合增多，使血清中结合珠蛋白减少，测定血清中结合珠蛋白的含量可反映溶血的情况。;尿含铁血黄素试验;【应用评价】尿含铁血黄素试验阳性提示慢性血管内溶血。 无论有无血红蛋白尿，只要存在慢性血管内溶血如PNH，本试验即呈阳性，并可持续数周。 但在溶血初期，虽然有血红蛋白尿，上皮细胞内尚未形成可检出的含铁血黄素，此时本试验可呈阴性反应。;【参考区间】正常人呈阴性;【应用评价】血管内溶血时，血浆中游离血红蛋白大量增加，血浆中可检测出高铁血红素白蛋白。只有在严重溶血时，Hp与Hx均被耗尽，高铁血红素方与白蛋白结合成高铁血红素白蛋白；故血清中出现高铁血红素白蛋白是溶血严重的指标。;;红细胞直径为6～9μm，呈双层凹面的圆盘状;概述;;红细胞膜为脂质双层结构，蛋白质镶嵌在脂质双层内又相互连续形成膜的骨架。电镜下观察红细胞膜呈三层暗-亮-暗区带，外层含糖脂、糖蛋白和蛋白质，具亲和水性；中间层含磷脂、胆固醇、蛋白质为疏水性；内层主要包含蛋白质，呈亲水性。;红细胞膜结构的两个基本的特征;;;（一）红细胞渗透脆性试验;【参考区间】 简易半定量法： 开始溶血：3.8～4.6g/L 完全溶血：2.8～3.2g/L;（二）红细胞孵育渗透脆性试验;【参考区间】 未孵育50%溶血：4.00～4.45g NaCL/L； 37℃孵育24h 50%溶血：4.65～5.90g NaCL/L;（三）红细胞自身溶血试验及其纠正试验;1;（??）酸化甘油溶血试验;（五）酸化血清溶血试验;（六）蔗糖溶血试验;（七）血细胞表型分析;（八）红细胞膜蛋白电泳分析;红细胞膜缺陷检查的应用;（一）遗传性球形红细胞增多症;实验室检查;诊断和鉴别诊断;（二）遗传性椭圆形红细胞增多症;诊断和鉴别诊断;（三）遗传性口形红细胞增多症;诊断和鉴别诊断;（四）阵发性睡眠性血红蛋白尿症;实验室检查;诊断和鉴别诊断;PNH与再障的鉴别;;最常见的为葡萄糖6-磷酸脱氢酶缺陷症、丙酮酸激酶缺陷症。;红细胞的糖代谢;实验室检查;（二） 变性珠蛋白小体生成试验;1．G-6-PD缺乏症常高于45%，可作G-6-PD缺乏的筛检试验。但还原型谷胱甘肽缺乏症也增高；不稳定血红蛋白病含小体的细胞百分率为75%～84%，HbH病和化学物质中毒时也增高。 2．变性珠蛋白小体，主要是α、β珠蛋白链的病变而引起的溶解度和稳定性降低所致；是一种变性血红蛋白颗粒，一般附着在细胞膜上，故又称血红蛋白包涵体，变性珠蛋白小体可被碱性染料着色。该实验与异丙醇试验和热不稳定实验一样可作为不稳定血红蛋白存在的一种证据。 3．G-6-PD活性正常时，红细胞通过磷酸戊糖旁路形成NADPH使MHb还原成亚铁血红蛋白，因而含变性珠蛋白小体的红细胞减少，而G-6-PD活性减低时，NADPH减少，MHb增多，导致含变性珠蛋白小体的红细胞增多，不稳定血红蛋白由于血红蛋白分子结构发生改变，稳定性减低易被氧化，含变性珠蛋白小体的红细胞可增多，伯氨喹啉型溶血性贫血，含变性珠蛋白小体的红细胞也可增多。;在G-6-PD和NADP+存在下，G-6-PD能使NADP+还原成NADPH，后者在紫外线照射下会发出荧光。NADPH的吸收峰在波长340nm处，可通过单位时间生成的NADPH的量来测定G-6-PD活性。;（四） 丙酮酸激酶荧光斑点试验和活性测定;红细胞G-6-PD基因突变致活性降低和/或酶性质改变，是一种X性连锁隐性或不完全显性遗传性疾病。 G-6-PD缺乏时，红细胞膜脂质和膜蛋白巯基的氧化，引起红细胞僵硬，易被脾脏和肝脏中的巨噬细胞破坏导致溶血。;1．溶血的检查 非遗传性有诱因，急性溶血，血管内溶血；而遗传性非球形细胞溶血性贫血具有慢性血管外溶血的实验室特征 2．G-6-PD缺乏的筛检试验 高铁血红蛋白还原试验、荧光斑点试验、硝基四氮唑蓝纸片法。荧光斑点试验的特异性最高，高铁血红蛋白还原试验的敏感性最强 3．G-6-PD确诊试验 G-6-PD活性定量检测能准确反映酶的活性。;诊断依据是红细胞G-6-PD活性的实验室检查，临床表现及阳性家族