中药制剂质量分析 标准曲线法测定含量 标准曲线法测定含量.ppt

中药制剂的含量测定技术 ——标准曲线法测定含量 * 目录 基础知识 1 必备知识 2 拓展知识 3 * 基础知识 紫外-可见分光光度法的定量分析依据是朗伯-比尔定律。其物理意义是：当一束平行的单色光通过均匀的非散射体系的低浓度溶液时，在单色光强度、溶液温度等条件不改变的情况下，吸光度与液层的厚度(光程长度)和吸光物质浓度的乘积成正比。其数学表达式为：A=KCL 式中，A为吸光度；K为吸收系数；C为溶液浓度；L为液层厚度。 吸收系数是指吸光物质在单位浓度及单位厚度时的吸光度。 吸收系数K ：百分吸收系数、摩尔吸收系数。《中国药典》采用百分吸收系数。 定量方法有吸收系数法、对照品法、标准曲线法。 配制一系列不同浓度的对照品溶液，选择合适的参比溶液，在相同条件下分别测定各对照品溶液的吸光度。以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标绘制A-C曲线，称为标准曲线或工作曲线。然后在完全相同的条件下测定样品溶液的吸光度，从标准曲线(或回归直线)上查出样品溶液的对应浓度，或代入回归方程，求出样品溶液的浓度。 标准曲线法测定含量 必备知识 标准曲线 在做精密测量时，用对照品溶液的浓度进行线性回归，求出回归直线方程（相关系数r≥0.999），绘出回归直线代替标准曲线，以尽量消除偶然误差。 亦可利用计算器将一系列对照品溶液的浓度与相应的吸光度进行一元线性回归，求出回归方程（相关系数≥0.9990），将供试品溶液的吸光度代入回归方程，算出供试品溶液的浓度。 标准曲线法测定含量 必备知识 回归方程：A=a+bC 式中，A为被测溶液吸光度；C为被测溶液浓（g/ml）；a为截距；b为斜率。 标准曲线法测定含量 必备知识 标准曲线法多用于可见分光光度法，由于显色时影响颜色深浅的因素较多，有的仪器单色光纯度较差，故测定时应用对照品同时操作。 本法适用于批量供试品的分析，当仪器和测定条件固定时，标准曲线可多次使用。 拓展知识 *