发酵过程控制技术 04-02发酵液氨基酸态氮测定 教学课件—发酵液氨基酸态氮测定.pptVIP

子情境：冬虫夏草发酵过程检验 —发酵液氨基酸态氮测定 冬虫夏草的认识 冬虫夏草, 又名虫草，是麦角科真菌冬虫夏草寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合物，是一种重要的药用真菌 冬虫夏草的药理作用 冬虫夏草是我国的一种名贵中药材，与人参、鹿茸一起列为中国三大补药。 1、调节免疫系统功能 2、直接抗肿瘤作用 3、提高细胞能量、抗疲劳 4、调节心脏功能 5、调节肝脏功能 6、调节呼吸系统功能 7、调节肾脏功能 8、调节造血功能 9、调节血脂 冬虫夏草的发酵生产 自然冬虫夏草分离纯化→ 试管斜面种→ 振荡器液体一级种→ 二级种→ 小型种子发酵种子罐→ 生产发酵罐 → 浓缩→ 喷粉干燥→ 成品菌粉。 氨基氮的测定在发酵过程中的意义 分析出菌体生长的情况及含氮化合物的合成情况; 控制适量的氮以保证代谢产物的和成; 发现氮元素含量减少，我们必须适当进行补氨操 作，以保证菌体的正常生长; 在发酵的后期经检测 ,氮含量过高 ,及时进行放罐操作 氨基氮的测定方法 茚三酮比色法 ①原理: 茚三酮与氨基酸作用形成蓝色化合物,580nm波长下测定吸光度 。 甲醛滴定法 单指示剂 ： 氨基酸中的—NH2基的pK值常在9.0以上，不能用NaOH标准溶液直接滴定。但可以用甲醛法测量。在pH中性和常温条件下，甲醛迅速与氨基酸中α—氨基相互作用，使滴定终点移至pH9.0左右，可以用酚酞作指示剂，以NaOH标准溶液来滴定—NH3+基上的H+，每释放一个氢离子，就相当有一个氨基氮。 双指示剂 与单指示剂法相同，只是在此法中使用了两种指示剂。从分析结果看，双指示剂甲醛滴定法与亚硝酸氮气容量法(此法操作复杂，不作介绍)相近单色滴定法稍偏低，主要因为单指示剂甲醛滴定法是以氨基酸溶液PH值作为酚酞的终点。PH值在9.2，而双指示剂是以氨基酸溶液的PH值作为中性红的终点，PH值为7.0，从理论计算看，双色滴定法较为准确。 操作步骤： ? 移取一定量(约含20毫克左右的氨基酸)样品溶液2份,分别置于250毫升锥形瓶中,加水50毫升;其中一份加3滴中性红指示剂，用0.100NNaOH溶液滴定至琥珀色为终点。另一份加入中性甲醛10毫升及3滴百里酚酞指示剂，摇匀，静置1分钟，(此时蓝色应消失)。再用0.100NNaOH溶液滴定至淡蓝色。记录两次滴定所消耗的碱液毫升数 计算： 氨基酸态氮(％)=（(V1-V2)×N×0.014）×100/W 式中： N：NaOH标准溶液当量浓渡。 V1：测定样品消耗NaOH标准溶液的体积(ml)。 V2：测定空白消耗NaOH标准溶液的体积(ml)。 W：样品溶液相当样品的质量(克)。 0.014：氮的毫克当量。