欧蒙印迹法检测ANA抗核抗体 实验报告[汇编].pdfVIP

实验1：抗ANA 自身抗体的检测（欧蒙斑点法） 一、实验目的及原理 抗核抗体（antinuclear antibody ，ANA ）是一组针对细胞核成分的自身抗体。 ANA 阳性提示患有自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、混 合性结缔组织病、干燥综合症、全身性硬皮病、原发性胆汁性肝硬化等。 根据细胞内各分子的理化特性和分布部位，ANA 可分为抗DNA 抗体、抗组 蛋白抗体、抗非组蛋白抗体、抗核仁抗体和抗其他细胞成分抗体。 在本实验中，抗核抗体谱（IgG）检测试剂盒（欧蒙印迹法）的检测模条上 平行包被了高度纯化的自身抗原。用于体外定性检测人血清或血浆中的抗 nRNP/Sm、Sm、SS-A （天然SS-A 和Ro-52）、SS-B 、Scl-70、PM-Scl、Jo-1) CENPB、PCNA、dsDNA、核小体、组蛋白、核糖体P 蛋白和AMAM2 共14 种不 同抗原IgG 类抗体。 欧蒙印迹法的实验原理如下：样本血清与包被抗原的检测膜条温育，如果 标本为阳性血清，则血清中的自身抗体将与膜条相应位点上的自身抗原特异性 结合。洗膜后添加碱性磷酸酶（AP ）标记的羊抗人IgG （二抗），将与结合在膜 条相应抗原位点上的自身