大肠菌群MPN计数.docVIP

第一法 操作步骤 6.1、样品的稀释 6.1.1、固体和半固体样品：称取 25g 样品，放人盛有 225ml 磷酸盐缓冲液 或生理盐水的无菌均质杯内， 8 00or/min-10 000r/min 均质 1min-2 min ，或放人 盛有 225ml 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打 1 min-2 min，制成 1:10 的样品匀液。 6.1.2、液体样品：以无菌吸管吸取 25ml 样品，置盛有 225ml 磷酸盐缓冲液 或生理盐水的无菌锥形瓶（瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分棍匀，制成 1:10 的样品匀液。 6.1.3、样品匀液的 pH 值应在 6.5-7.5 之间， 必要时分别用 1mol/L 氢氧化钠（ NaOH ）或 1 mol/L 盐酸（ HCI ）调节。6.1.4、用 1ml 无菌吸管或微量移液器吸取 1:10 样品匀液 1ml，沿管壁缓缓 注人 9ml 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管或换用 1 支 1ml 无菌吸管反复吹打，使其混合均匀，制成 1:100 的样品匀液。 6.1.5、根据对样品污染状况的估计，按上述操作，依次制成 10 倍递增系列 稀释样品匀液。每递增稀释 1 次，换用 1 支 1ml 无菌吸管或吸头。 从制备样品匀液至样品接种完毕，全过程不得超过 15 min。