食品微生物学实验.pdfVIP

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实验一 普通光学显微镜的构造与使用 (一)实验目的 1.学习并掌握油镜的原理和使用方法。 2.学习普通台式显微镜的结构、各部分的功能和使用方法。 (二)实验原理 显微镜的构造 普通光学显微镜的构造可分为两大部分:一为机械装置,一为光 学系统,这两部分很好的配合,才 发挥显微镜的作用。 1.显微镜的机械装置 显微镜的机械装置包括镜座、镜筒、物镜转换器、载物台、推动器、 粗动螺旋、微动螺旋等部件 (1)镜座 镜座是显微镜的基本支架,它由底座和镜臂两部分组成。 在它上面连接有载物台和镜筒,它是用来安装光学放大系统部件的基 础。 (2)镜筒 镜筒上接接目镜,下接转换器,形成接目镜与接物镜(装 在转换器下)间的暗室。 从物镜的后缘到镜筒尾端的距离称为机械筒长。因为物镜的放大 率是对一定的镜筒长度而言的。镜筒长度的变化,不仅放大倍率随之 变化,而且成像质量也受到影响。因此,使用显微镜时,不能任意改变 镜筒长度。国际上将显微镜的标准筒长定为 160mm,此数字标在物镜 的外壳上。 (3)物镜转换器 物镜转换器上可安装 3—4 个接物镜,一般是三 个接物镜(低倍、高倍、油镜)。Nikon 显微镜装有四个物镜。转动转换 器,可以按需要将其中的任何一个接物镜和镜筒接通,与镜筒上面的 接目镜构成一个放大系统。 (4)载物台 载物台中央有一孔,为光线通路。在台上装有 簧标 本夹和推动器,其作用为固定或移动标本的位置,使得镜检对象恰好 位于视野中心。 (5)推动器 是移动标本的机械装置,它是由一横一纵两个推进 齿轴的金属架构成的,好的显微镜在纵横架杆上刻有刻度标尺,构成 很精密的平面座标系。如果我们须重复观察已检查标本的某一部分, 在第一次检查时,可记下纵横标尺的数值,以后按数值移动推动器,就 可以找到原来标本的位置。 (6)粗动螺旋 粗动螺旋是移动镜筒调节接物镜和标本间距离的 机件,老式显微镜粗螺旋向前扭,镜头下降接近标本。新近出产的显 微镜(如Nikon 显微镜)镜检时,右手向前扭载物台上升,让标本接近 物镜,反之则下降,标本脱离物镜。 (7)微动螺旋 用粗动螺旋只可以粗放的调节焦距,要得到最清 晰的物象,需要用微动螺旋做进一步调节。微动螺旋每转一圈镜筒移 动 0.1 毫米(100 微米)。新近出产的较高档次的显微镜的粗动螺旋和微 动螺旋是共轴的。 2.显微镜的光学系统 显微镜的光学系统由反光镜,聚光器,接物镜,接目镜等组成,光 学系统使物体放大,形成物体放大像 。 (1)反光镜 较早的普通光学显微镜是用自然光检视物体,在镜座 上装有反光镜。反光镜是由一平面和另一凹面的镜子组成,可以将投 射在它上面的光线反射到聚光器透镜的中 央,照明标本。不用聚光 器时用凹面镜,凹面镜能起会聚光线的作用。用聚光器时,一般都用 平面镜。新近出产的较高档次的显微镜镜座上装有光源,并有 电流调 节 螺旋,可通过调节电流大小调节光照强度。 (2)聚光器 聚光器在载物台下面,它是由聚光透镜、虹彩光圈和 升 降螺旋组成的。聚光器可分为明视场聚光器和暗视场聚光器。普 通光学显微镜配置的都是明视场聚光器,明视场聚光器有阿贝聚光器、 齐明聚光器和摇出聚光器。阿 贝聚光器在物镜数值孔径高于0.6 时会 显示出色差和球差。齐明聚光器对色差、球差和慧差的校正程度很高, 是明视场镜检中质量最好的聚光器,但它不适于 4 倍 以下的物镜。摇 出聚光器能将聚光器上透镜从光路中摇出满足低倍物镜(4×)大视场照 明的需要。 聚光器安装在载 物台下,其作用是将光源经反光镜反射来的光 线聚焦于样品上,以得到最强的照明,使物象获得明亮清晰的效果。聚 光器的高低可以调节,使焦点落在被检物体上, 以得到最大亮度。一 般聚光器的焦点在其上方 1.25mm 处,而其上升限度为载物台平面下 方 0.1mm。因此,要求使用的载玻片厚度应在 0.8—1.2mm 之间,否则 被检样品不在焦点上,影响镜检效果。聚光器前透镜组前面还装有虹 彩光圈,它可以开大和

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