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核酸检测基本知识 1. 什么是核酸检测 核酸的定义：核酸是由核苷酸或脱氧核苷酸通过 3 ′， 5 ′- 磷酸二酯键连接而成的一类生物大分子。 核酸具有非常重要的生物功能，主要是贮存遗传信息 和传递遗传信息。 2. 核酸的分类 核酸大分子可分为两类：脱氧核糖核酸（ DNA）和核糖 核酸（ RNA）。 3. 核酸的组成 DNA和 RNA都是由一个一个核苷酸 (nucleotide) 头尾相 连而形成的，由 C、H、O、 N、P，5种元素组成。 DNA是绝大 多数生物的遗传物质， RNA是少数不含 DNA的病毒（如 HIV病 毒，流感病毒， SARS病毒等）的遗传物质。 RNA平均长度大 约为 2000个核苷酸，而人的 DNA却是很长的，约有 3X10^9个 核苷酸。 4. 核酸的功能 在蛋白质的复制和合成中起着储存和传递遗传信息的 作用。核酸不仅是基本的遗传物质，而且在蛋白质的生物 合成上也占重要位置，因而在生长、遗传、变异等一系列 重大生命现象中起决定性的作用。 DNA与 RNA都是核酸，它们在化学组成上有什么区别如 下： DNA与RNA的比较 DNA RNA 主要存在部位 细胞核 细胞质 基本组成单位 脱氧核苷酸 核糖核苷酸 碱基种类 A、G、C、T A、G、C、U 五碳糖种类 脱氧核糖 核糖 核苷酸链 两条脱氧核苷酸链 一条核糖核苷酸链 5. 检测方法 核酸检测方法，主要通过同时进行靶核酸扩增和可检 测信号的生成来检测样品中的靶核酸。可应用于临床微生 物学、血液筛选、遗传病诊断和预防、法医学等领域的核 酸检测。 目前主要使用的方法有以下几种： a. 核酸序列依赖性扩增法 NASBA是由一对引物介导的、连续均一的、体外特异性 核苷酸序列等温扩增 RNA的新技术。反应在 42 ℃进行 , 可在 2h 内将 RNA模板扩增约 109倍。 NASBA原理是提取病毒 RNA,加 入 AMV逆转录酶、 RNA酶 H、T7RNA聚合酶和引物进行扩增。 整个反应分非循环相和循环相 : 在非循环相中 , 引物 I 与模板