生物化学检验技术（2015）、生物化学检验技术 酶活性的测定方法、工具酶分析 工具酶分析.pptxVIP

第五章 酶学分析技术;工具酶的概念、代谢物测定中常用的指示反应;;表5-3 常用工具酶的名称及其缩写符号;例如葡萄糖的测定中，在己糖激酶（HK）催化下，葡萄糖和ATP发生磷酸化反应，生成葡萄糖-6-磷酸(G-6-P)与ADP。前者在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)催化下脱氢，生成6-磷酸葡萄糖酸内酯，同时使NADP还原成NADPH，然后检测340nm吸光度的改变，间接测得葡萄糖浓度。在这里，血清葡萄糖为待测物，HK、G-6-PD为工具酶，其作用相当于试剂。;;辅助反应 如果一些酶促反应找不到合适的指示酶与其直接偶联，此时还可在始发反应和指示反应之间加入另一种酶，将二者连在一起，此反应称为辅助反应。 模式为：;;酶偶联法测定ALT的吸光度变化图 ;;优点:应用广泛;2．过氧化物酶（POD） ;优点：①在可见光范围测定，便于推广应用； ②对酶的纯度要求不高，故生产方便，价格低廉； ③灵敏度高于脱氢酶系统。;呈色系统