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PAGE PAGE #/ 5 BCA蛋白浓度测定试剂盒使用说明书 产品简介 蛋白质定量是蛋白质研究的基础工作之一。博奥森开发的 BCA蛋白质检测 试剂（bicinchonic acid是理想的蛋白质定量方法；是当前比Lowry法更优越的专用 于检测总蛋白质含量的产品。该方法以快速灵敏、稳定可靠，对不同种类蛋白 质检测的变异系数非常小而倍受专业人士的青睐。 BCA法测定蛋白浓度不受绝 大部分样品中的化学物质的影响。在组织细胞裂解实验中，常用浓度的去垢剂 SDS，TritonX-100，Tween 不影响检测结果，但受螯合剂 （EDTA，EGTA、） 还原剂 （DTT巯基乙醇）和脂类的影响。实验中，若发现样品稀释液或裂解液本身背 景值较高，可试用 Bradford 蛋白浓度测定试剂盒。该产品不受此影响，因此与 之配合使用，可免除您实验中的许多烦恼。 基本原理 碱性条件下，蛋白将Cu2+还原为Cu+，Cu+与 BCA试剂形成紫颜色的络合 物，测定其在562nm处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓 度。 主要特点 准确XX线性XX： BCA试剂的蛋白质测定范围是 10-2000ug/ml; 2?快速：45分钟内完成测定，比经典的Lowry法快4倍而且更加方便。 经济实用： 在微孔板中进行测定，可大大节约样品和试剂用量。 不受样品中离子型和非离子型去污剂影响。 检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马氏亮蓝。 包装及保存 BCA试剂A70ml室温保存 BCA试剂 B1.4ml 室温保存 蛋白标准 C0.5ml-20C 保存(5mg/1ml BSA) 本试剂盒自订购 xx 一年内有效。 注意事项 1?在低温条件或长期保存出现沉淀时，可搅拌或 37C温育使溶解，如发现细 菌污染则应丢弃 样品中若含有 EDT A、EGT A、DTT硫酸铵、脂类会影响检测结果，请试用 Bradford蛋白浓度测定试 剂盒；高浓度的去垢剂也影响实验结果，可用 TCA沉淀去除干扰物质。 要得到更为精确的蛋白浓度结果，每个蛋白梯度和样品均需做复孔 ,每次 均应做标准曲线。 4?当试剂A和B混合时可能会有浑浊，但混匀后就会消失，工作液在密闭 情况下可保存 1 周。 5 .需准备37C水浴或温箱、酶标仪或普通分光光度计，测定波长为 540- 595nm 之间， 562nm 最佳。酶标仪需与 96 孔酶标板配套使用。使用分光光度计 测定蛋白浓度时，试剂盒测定的样品数量会因此而减少。使用温箱孵育时，应 注意防止因水粉蒸发影响检测结果。 使用说明 配制工作液 : 根据标准品和样品数量，按 50体积BCA试剂A加1体积BCA试剂B （50:1 ）配制适量BCA工作液，充分混匀。BCA工作液室温24小时内稳定。 稀释标准品： 取10微升标准品用PBS稀释至100微升（标准品一般可用PBS稀释），使 终浓度为 0.5mg/ml。将标准品按0, 1,2, 4, 8, 12, 16, 20微升加到96孔板的蛋白标准 品孔中，力口 PBS补足到20微升。 3?加适当体积样品到96孔板的样品孔中，补加PBS到20微升。 各孔加入200微升BCA工作液，37C放置30分钟。 5?冷却到室温，用酶标仪测定 A562，根据标准曲线计算出蛋白浓度。BCA 蛋白浓度测定试剂盒使用说明书 产品简介 蛋白质定量是蛋白质研究的基础工作之一。博奥森开发的 BCA蛋白质检测 试剂（bicinchonic acid是理想的蛋白质定量方法；是当前比Lowry法更优越的专用 于检测总蛋白质含量的产品。该方法以快速灵敏、稳定可靠，对不同种类蛋白 质检测的变异系数非常小而倍受专业人士的青睐。 BCA法测定蛋白浓度不受绝 大部分样品中的化学物质的影响。在组织细胞裂解实验中，常用浓度的去垢剂 SDS TritonX-100, Tween不影响检测结果，但受螯合剂（EDTA EGTA）还原剂 （DTT巯基乙醇）和脂类的影响。实验中，若发现样品稀释液或裂解液本身背 景值较高，可试用 Bradford 蛋白浓度测定试剂盒。该产品不受此影响，因此与 之配合使用，可免除您实验中的许多烦恼。 基本原理 碱性条件下，蛋白将Cu2+还原为Cu+, Cu+与 BCA试剂形成紫颜色的络合 物，测定其在 562nm 处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓 度。 主要特点 准确XX线性XX： BCA试剂的蛋白质测定范围是 10-2000ug/ml; 2?快速：45分钟内完成测定，比经典的Lowry法快4倍而且更加方便。 经济实用： 在微孔板中进行测定，可大大节约样品和试剂用量。 不受样品中离子型和非离子型去污剂影响。 检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马氏亮蓝。 包装及保存 BCA试剂A70ml室温保存 BCA