微生物发酵技术 学习指南 《微生物发酵技术》学习指导.docVIP

PAGE PAGE 2 《微生物发酵技术》学习指导 单元一 绪论 一、学习目标 1.知识目标 了解微生物发酵制药的发展历史及趋势； 掌握微生物发酵的工艺流程及相关技术。 2.能力目标 初步具备查阅文献资料的能力。 二、学习要点 1.微生物发酵制药的工业类型：微生物菌体发酵、微生物酶发酵、微生物代谢产物发酵、微生物转化发酵、生物工程细胞的发酵 2.微生物发酵制药特点 （1）微生物制药是一个极其复杂的生产过程，但目标反应过程是以生命体的自动调节方式进行，数十个反应过程能够在发酵设备中一次完成。 （2）反应通常在常温常压下进行，条件温和，能耗小，设备较简单。 （3）原材料来源丰富，价格低廉，过程中废物的危害性较小，但原料成分往往难以控制，给产品质量带来一定影响。 （4）由于活的生命体参加反应，受微生物代谢特征的限制（不耐高渗透压、高浓度底物或产物易导致酶活下降）反应液中底物浓度不应过高，产物浓度不应过高，导致生产能力下降，设备体积庞大。 （5）微生物参与制药反应，能够高度选择地进行复杂化合物在特定部位进行氧化、还原、脱氢、脱氨及官能团引入或去除等反应，易产生复杂的高分子化合物。 （6）微生物发酵过程是微生物菌体非正常的、不经济代谢过程，生产过程中应为其代谢活动提供良好的环境。 （7）药品的质量标准不同，生产环境亦不同， （8）现代微生物发酵制药的最大特点是高技术含量、智力密集、全封闭自动化、全过程质量控制、大规模反应器生产和新型分离技术综合利用等。 3. 微生物发酵药物的分类：抗生素类药物、氨基酸类药物、核苷酸类药物、维生素类药物、治疗酶及酶抑制剂。 单元二 微生物发酵制药技术基础 一、学习目标 1.知识目标 熟悉工业发酵中培养基的成分、类型、选择方法等；掌握酸解法和酶解法制备葡萄糖的原理和工艺流程。 了解培养基灭菌的原理（对数残留定律）；熟悉影响灭菌的因素；掌握分批灭菌和连续灭菌的灭菌条件和操作流程；掌握空罐灭菌、空气过滤器灭菌和管路的灭菌条件。 了解空气过滤除菌机理；熟悉过滤除菌所用介质的种类和使用要求、空气的预处理流程、提高空气过滤除菌效率的措施；掌握五种空气过滤除菌流程和发酵用无菌空气的质量标准。 熟悉分批发酵、连续发酵、补料分批发酵三种不同操作方式的概念、优缺点、适用情况。 了解微生物对氧的需求、影响微生物需氧量的因素、影响发酵过程中供氧的因素；了解泡沫产生的原因、规律及对发酵的危害；了解补料的目的、方式、时间、内容；熟悉发酵过程的主要控制参数；熟悉发酵终点的判断方法；掌握发酵过程中的温度、pH、溶氧浓度对发酵的影响及其控制方法；掌握泡沫的消除方法。 熟悉染菌对不同发酵过程的影响以及染菌发生的不同时间对发酵的影响；熟悉杂菌污染的挽救与处理方法；熟悉发酵染菌原因；熟悉噬菌体污染的主要症状和检查方法；掌握染菌的检查和判断方法；掌握杂菌污染的途径和防治措施；掌握噬菌体感染的途径与防治措施。 2.能力目标 会根据工业需求选择或设计合适的培养基； 会用双酶法制备葡萄糖水解液； 会按照操作规程进行分批灭菌和连续灭菌； 能对空气进行过滤除菌； 会正确选择发酵操作方式； 能控制发酵过程中的温度、pH值、溶解氧浓度； 能消除发酵过程中的泡沫、控制补料、判断发酵终点； 能采取一定的措施减少发酵过程中杂菌的污染和噬菌体感染； 能检查和判断出是否染菌并能分析出染菌的原因。 二、学习要点 1.培养基的成分包括碳源、氮源、无机盐、生长因子及水等。发酵培养基还有专用添加剂：前体物质、促进剂和抑制剂。 2.工业培养基常用的碳源：糖类（淀粉、葡萄糖、蔗糖等）、油脂（动、植物油）、有机酸（琥珀酸、柠檬酸、乳酸、乙酸等）和低碳醇（甲醇、乙醇等）。 常用的糖类：葡萄糖，所有的微生物都能利用葡萄糖，但是会引起葡萄糖效应。 糖蜜，是制糖生产时的结晶母液，它是制糖工业的副产物。主要含有蔗糖，总糖可达50%～75%。一般糖蜜分甘蔗糖蜜和甜菜糖蜜葡萄糖蜜。除糖分外，含有较多的杂质，其中有些是有用的，但是许多都会对发酵产生不利的影响，需要进行预处理。 淀粉、糊精，缺点：难利用、发酵液比较稠、一般2.0%时加入一定的α-淀粉酶。成分比较复杂，有直链淀粉和支链淀粉等等。优点：来源广泛、价格低，可以解除葡萄糖效应。 3.发酵工业上常用的氮源主要用于构成菌体细胞物质（氨基酸，蛋白质、核酸等）和含氮代谢物。常用的氮源可分为两大类：有机氮源和无机氮源。 （1）无机氮源种类：氨盐、硝酸盐和氨水 特点：微生物对它们的吸收快，所以也称之谓迅速利用的氮源。但无机氮源的迅速利用常会引起pH的变化。 无机氮源被菌体作为氮源利用后，培养液中就留下了酸性或碱性物质，这种经微生物生理作用（代谢）后能形成酸性物质的无机氮源叫生理酸性物质，如硫酸胺，若菌体代谢后能产生碱性物质的则此种无机氮源