第八章基因工程与体外表达ppt.pptx

基因工程与体外表达 Gene Engineering and Gene Expression ; 基因工程是指在体外对DNA分子按照既定的目的和方案，对DNA进行剪切和重新连接，然后把它导入宿主细胞，从而能够扩增有关DNA片段，表达有关基因产物，进行DNA序列分析，基因治疗，研究基因表达的调节因子（如启动子、增强子等），以及研究基因的功能等。 ;?????第一节 基因工程中的工具酶 一、限制性核酸内切酶（restriction enzyme） 它是一种核酸内切酶，能从双链DNA内部特异位点识别并且裂解磷酸二酯键。 ; ;2．限制性内切酶的命名 EcoRⅠ E代表Escherichia属 co代表coli 种 R代表RY13株 ;3．限制性内切酶的识别和切割位点 通常是4～6个碱基对、具有回文序列（palindrom）的DNA片段，大多数酶是错位切割双链DNA，产生5ˊ或3ˊ粘性末端（sticky end）。 ;PstⅠ切割后产生3ˊ粘性末端：;二、其他常用的工具酶 1. DNA聚合酶Ⅰ (DNA polymerase I)