浙江省2020版高考生物二轮复习第18讲微生物的利用和生物技术在食品加工中的应用教案.pdfVIP

第18讲 微生物的利用和生物技术在食品加工中的应用 考点 考试内容 考试要求 1.大肠杆菌的培养和分离 微生物的利用 实验与探究能力 2.分离以尿素为氮源的微生物 生物技术在食品加工 1.果酒及果醋的制作 实验与探究能力 中的应用 2.泡菜的腌制和亚硝酸盐的测定 微生物的利用 1．大肠杆菌的培养和分离 (1)大肠杆菌的性质与作用：大肠杆菌是革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌，是基因工程 技术中被广泛采用的工具。 (2)大肠杆菌的扩大培养与分离：用LB液体培养基扩大培养，再在LB 固体平面培养基上 划线分离，培养后形成一个个单独的菌落。 (3)细菌的培养和分离 ①划线分离法：方法简单。 ②涂布分离法：单菌落易分开，但操作复杂。 (4)培养和分离步骤 培养基灭菌→倒平板→培养液培养→划线分离→培养单菌落―→保存。 2．分离以尿素为氮源的微生物 (1)实验原理：利用尿素的细菌含有脲酶，通过降解尿素作为其生长的氮源。其反应式为 脲酶 (NH)C===O＋HO――→2NH ＋CO，生成的NH 使培养基的pH 由原来的中性变为碱性，于是培养 2 2 2 3 2 3 基中的酚红由红黄色变成红色。 (2)实验步骤：制备培养基→制备细菌悬液→涂布分离法分离→培养和观察。 (3)预测本实验的结果：LB全营养固体培养基上的菌落多而杂；尿素固体培养基上的菌落 －4 －5 少而纯；一定时间内，菌落周围出现红色区域。用浓度为10 和 10 土壤稀释液接种，更容 －5 易形成单菌落的是10 土壤稀释液。 3．构建微生物的培养与应用网络 4．有关微生物实验的基本方法 (1)制备培养基：计算→称量→融化→灭菌→倒平板。 (2)无菌技术：主要指消毒和灭菌。 (3)倒平板操作：待培养基冷却至 50 ℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。 (4)划线分离操作：划线分离是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚 集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。 (5)涂布分离法：先将菌液进行一系列梯度稀释后，分别涂布到琼脂固体培养基的表面进 行培养，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而在培养 基表面形成单个菌落。如图： (2018·浙江11月选考)回答与微生物培养及应用有关的问题： (1)对培养基进行高压蒸汽灭菌时，灭菌时间应从____________________时开始计时。对 于不耐热的液体培养基，一般可将其转 G6玻璃砂漏斗中，采用________方式可较快地进行 过滤灭菌。 (2)与酿造果醋相比，利用大米、高粱等富含淀粉的原料制醋，需增加__________________ 的过程。某醋化醋杆菌培养基由蛋白胨、酵母提取物和甘露醇组成，其中甘露醇的主要作用 是________________________________________________________________________。 (3)为筛选胞外 α淀粉酶分泌型菌种，一般从 __________(A.果园树下 B．肉类加工厂 周围 C．米酒厂周围 D．枯树周围)获得土样，用无菌水稀释，涂布到含有淀粉的选择培养 基上培养，一段时间后在培养基表面滴加碘液，可在菌落周围观察到透明的水解圈。若要筛 选酶活性较高的菌种，需挑选若干个 ________________________比值大的菌落，分别利用液 体培养基振荡培养进行扩增。然后将培养液离心，取________用于检测酶活性。