黑豆皮花青素对C.elegans衰老及阿尔茨海默症的影响.pdf

目 录 中 文 摘 要 I Abstract III 第一章 文献综述 1 1.1 黑豆皮花青素 1 1.1.1 黑豆皮花青素种类 1 1.1.2 黑豆皮花青素生物活性 1 1.2 衰老 3 1.2.1 衰老理论 3 1.2.2 与衰老相关疾病-阿尔茨海默症（AD ） 4 1.3 秀丽隐杆线虫 5 1.3.1 秀丽隐杆线虫生理特征 5 1.3.2 秀丽隐杆线虫的生命周期 5 1.3.3 秀丽隐杆线虫作为抗衰老研究优势 6 1.4 胰岛素/胰岛素样生长因子信号通路 7 1.5 研究目的与意义 8 第二章 BSCA 对野生型N2 线虫健康寿命的影响 9 2.1 实验材料 9 2.1.1 线虫菌株 9 2.1.2 实验试剂及仪器 9 2.2 实验方法 10 2.2.1 培养基及缓冲液的配制 10 2.2.2 E.coli OP50 的培养与保存 11 2.2.3 秀丽隐杆线虫的培养 11 2.2.4 BSCA 的提取及鉴定 12 2.2.5 BSCA 对野生型N2 线虫寿命影响 12 2.2.6 BSCA 对野生型N2 线虫生殖力影响 13 2.2.7 BSCA 对野生型N2 线虫运动能力和咽抽速率影响 13 2.2.8 BSCA 对野生型N2 线虫褐脂素积累影响 13 2.2.9 统计学分析 13 2.3 结果与分析 13 2.3.1 BSCA 成分的HPLC 分析 13 2.3.2 BSCA 延长野生型N2 线虫寿命 14 2.3.3 BSCA 对野生型N2 线虫生殖力、咽抽速率没有影响 15 2.3.4 BSCA 增加野生型N2 线虫运动能力 16 2.3.5 BSCA 减少野生型N2 线虫肠道褐脂素积累 16 2.4 讨论 17 第三章 BSCA 延长野生型N2 线虫寿命机制 19 3.1 实验材料 19 3.1.1 线虫株系 19 3.1.2 实验试剂及仪器 19 3.2 实验方法 20 3.2.1 BSCA 对应激胁迫下N2 线虫存活的影响 20 3.2.2 ROS 水平测定 20 3.2.3 抗氧化酶活性检测 21 3.2.4 BSCA 对突变株线虫寿命影响 21 3.2.5 线虫总RNA 提取及实时荧光定量PCR （qRT-PCR ） 21 3.2.6 统计学分析 22 3.3 结果与分析 22 3.3.1 BSCA 增加野生型N2 线虫应激抵抗 22 3.3.2 BSCA 降低野生型N2 线虫体内ROS 水平 23 3.3.3 BSCA 增加野生型N2 线虫体内抗氧化酶活性 24 3.3.4 BSCA 增加DAF-16 转录活性 25 3.3.5 BSCA 没有增加突变株线虫寿命 26 3.4 讨论 27 第四章 BSCA 对AD 的影响及其机制研究 29 4.1 实验材料 29 4.1.1 线虫品系 29 4.1.2 实验试剂及仪器 29 4.2 实验方法 30 4.2.1 线虫培养 30 4.2.2 寿命实验 30 4.2.3 运动能力检测 30 4.2.4 瘫痪实验 30 4.2.5 CL4176 线虫体内ROS 水平测定 30 4.2.6 抗