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思索题 第二章 分子克隆工具酶 1简述基因工程研究用工具酶类型和作用特点。 2.说明限制性内切核酸酶命名标准（举例）。 3.限制内切核酸酶星活性是指什么？ 在极端非标准条件下，限制酶能切割和识别序列相同序列，这个改变特殊性称星星活性。星星活性是限制性内切酶通常性质，任何一个限制酶在极端非标准条件下全部能切割非经典位点。 引发星星活性原因:甘油浓度高（5%），酶过量 （100U/ml），离子强度低（25 mmol/L），pH 值过高（8.0），或是加了有机溶剂如DMSO（二甲基亚砜）、乙醇、乙二醇、二甲基乙酰胺、二甲基 甲酰胺，或是用其它2价阳离子如Mn2+、Cu2+、Co2+ 或Zn2+替换了Mg2+。 4.T4 DNA ligase 和 E.coli ligase 有什么异同？ 5.连接酶反应温度怎样选择，为何？ 连接酶最适反应温度应是37℃ ，但在这一温度下粘性末端氢键结合不稳定，所以连接反应常采取最好温度通常在4-16℃间，通常多选择12-16℃ 30分钟到16小时。 6.什么是Klenow酶？有什么作用？ Klenow DNA聚合酶是从全酶中除去5′―3′外切活性肽段后大片段肽段，而聚合活性和 3′―5′外切活性不受影响。也称为Klenow片段（Klenow frgment），或E.coli DNA聚合酶 Ⅰ大片段（E.coli DNA polymeraseⅠlarge f