- 1、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
- 5、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
(一)单纯固定液
甲醛:
1.浓度: 40%,气体
2. 渗透力强,固定均匀,组织收缩小,
3. 不能使白蛋白和核蛋白沉淀
4. 保存脂类,必须用冷冻切片。是糖的保护剂
5.可固定高尔基体,线粒体
重铬酸钾
浓度: 1%-3%水溶液, 有毒,橘红色结晶
穿透速度快,几乎不收缩,经乙醇脱水后明显收缩,
未酸化的重铬酸钾不能使蛋白质沉淀,但可使蛋白质变为脂溶剂。酸化后可使蛋白质沉淀,此时染色体可被保存,但线粒体破坏。
固定高尔基体和线粒体有良好效果。
酸性染料着色好,碱性染料着色差
固定的组织需经流水冲洗 12-24h ,或用亚硫酸盐洗涤。
苦味酸
黄色结晶体,是一种强酸,易燃易爆,配成饱和溶液储藏
穿透慢,组织收缩明显,无明显硬化 。
能沉淀一切蛋白质
4.对脂肪和类脂无固定作用 。
可软化皮肤和火棉胶 ,不宜用火棉胶包埋
固定时间不宜超过 24h,
固定的组织应尽快放入 70%乙醇,滴加饱和碳酸锂或浓氨水,有助于除去苦味酸固定产生的黄色。
升汞
浓度为 5%-7%的水溶液,针状结晶
2.穿透力低,只宜固定薄片组织,单独应用组织收缩明显
3, 对蛋白质有固定作用,
对类脂和糖类无固定作用
临用时加冰醋酸
醋酸
刺激性气味的无色液体,低于 15℃为冰醋酸
5%的醋酸 PH为 2-8 ,可抑制细菌和酶的活性,可防止自溶。
穿透力强
不能沉淀白蛋白,球蛋白,但能沉淀核蛋白
不能固定脂肪和内酯,不能保存糖
. 固定线粒体和高尔基复合体不能用高浓度的醋酸,可较好的保存染色体 6, 缺点是组织膨胀明显,尤其对于胶原纤维和纤维蛋白
铬酸
为三氧化铬的水溶液,浓度 %-1%,强氧化剂,不能与乙醇,甲醛等混合
穿透力弱,一般组织需固定 12-24h ,固定的组织有收缩,
能沉淀蛋白质,核蛋白固定良好。
对脂肪无固定作用
固定线粒体和高尔基复合体
宜避光保存,以防蛋白质溶解。
必须彻底流水冲洗(≥ 24h)。
锇酸(四氧化锇)
淡黄色结晶, 剧毒,浓度 1%-2%,强氧化剂,不能与乙醇,甲醛等混合
渗透力极弱,易使组织变硬, 延长固定时间, 组织的脆性增加, 对染色不利 。
固定均匀,不沉淀蛋白质。
4.为脂类固定剂
适用于线粒体和内质网的固定
为电镜研究的必须固定剂。
固定目的不同,配方和浓度根据需要改变
固定后对碱性染料亲和力强,细胞核的染色效果好
应在临用前前几天配制以保证充分溶解。
丙酮
1.易挥发,易燃的无色液体,可与水,醇,氯仿,醚混合
渗透力强,对核的固定差
可使蛋白质沉淀
作用基本与乙醇相同,但对糖原无固定作用5.广泛用于酶组织化学中各种酶的固定
乙醇
无色液体,,还原剂,可与水无限相溶,有固定兼脱水作用用于固定的浓度为 80%-95%
2.渗透力弱,固定速度较慢,易使组织变脆,无水乙醇固定时,穿透速度快,渗透力差,使组织收缩
,能沉淀白蛋白,球蛋白,核蛋白
用于糖原的固定
50%以上乙醇可溶解脂肪和类脂体, 并可溶解血红蛋白, 对其他色素也有破坏。
三氯醋酸
为无色易潮解的结晶体,水溶液为强酸性,易溶于醇和醚,应密封保存
也是一种良好的脱钙剂
(二)混合固定液
B-5 固定液(醋酸钠 - 升汞 - 甲醛)
.多用于固定淋巴组织,
染色前应进行脱汞处理
配方:无水醋酸钠,升汞 6g,甲醛 10ml,蒸馏水 90ml.
Bouin 液
有一定毒性 ,应避免吸入或与皮肤接触
固定液偏酸,对抗原有一定损害,使组织收缩, 不适宜标本的长期保存
固定效果好,组织细胞结构完整。 细胞核着色鲜明,细胞质着色较差。
对脂肪固定效果好,尤适用于含脂肪的淋巴结,乳腺组织和脂肪瘤标本
适用于结缔组织染色,尤其是三色染色更为理想 。
配方:饱和苦味酸水溶液:甲醛水溶液:冰醋酸 =15:5: : 1
Carnoy 液
1.有防止乙醇的硬化和收缩作用,增加渗透力,外膜致密的组织可用其固定
固定速度快, 3mm厚组织块 1h 内即可固定,大块组织不超过 4h。3,固定细胞质和细胞核,对于 染色体固定佳 ,显示 DNA,RNA效果好 。
常用于糖原和尼氏体的固定
5.不能保存脂类,不适用脂肪染色。
配方:冰醋酸 10ml,氯仿 30ml,无水乙醇 60ml
Muller 液
作用缓慢,固定均匀,组织收缩小
多用于媒染和硬化神经组织
固定过程中,需常更换新鲜的液体
配方:重铬酸钾,硫酸钠,蒸馏水 100ml
Orth 液
渗透力强,组织收缩小
应临时配置,在暗处固定 ,固定 24h 左右,固定液变为黑色时不可用,固定后流水冲洗 12-24h。
固定胚胎组织,神经组织。脂肪组织
配方:重铬酸钾,硫酸钠,蒸馏水 100ml,37%-40%的甲醛 10ml(用时加入)
PFG液
适用于多种肽类抗原的固定,多用于免疫电镜研究
对
您可能关注的文档
最近下载
- 某住宅楼给水排水设计毕业论文(设计)计算书.doc VIP
- 婴幼儿发展心理学 同伴关系 同伴关系.pptx VIP
- 人教版九年级(初三)道德与法治下册全册教案.pdf VIP
- 会计学原理课程实验(第六版)张志康习题答案解析.pdf
- 20S517- 排水管道出水口.pdf VIP
- Bose博士SoundTouch 300 Soundbar 扬声器说明书.pdf
- 集团数字化中台系统建设项目_用户手册_设备主数据.docx VIP
- 17J008 挡土墙(重力式、衡重式、悬臂式)(最新).pdf VIP
- 具身智能的基础知识(68页 PPT).pptx
- 仪表桥架及保护管安装培训2(2021-03).pptx VIP
原创力文档


文档评论(0)