现代生物学导论_复习笔记.doc免费

１ 生命基本特征: 基本单位: 细胞 基本功能： 新陈代谢，生长，运动 通过繁殖延续，遗传基本物质: DNA 个体发育,系统进化 适应性 2 poly U 全部苯丙氨酸 内含子 外显子 不编码蛋白，原核无 编码蛋白 翻译：5-3 表达调控: 转录水平 前体加工 核膜向细胞质运输 细胞质中稳定性 mRNA选择性调节 蛋白质活化和后处理 ３ 基因文库的构建 将总DＮＡ包含的基因组各片段分别克隆在质粒或噬菌体载体上，便构成了该生物的基因文库。 费时费事 　 内含子序列 逆转录：以ｍRNA为模板，以短的寡核苷酸(oligo(dT)）分子作引物,加入dATＰ，　dTTＰ,　ｄGTP和dＣTＰ, ｏｌiｇo(dT)与ｍRＮＡ分子的多聚Ａ(ｐolyA)尾巴碱基配对。 大肠杆菌ＤNA聚合酶I的Kleｎoｗ片段的作用下:人工合成互补子链——互补DNA(ｃDNA)。 转录产生编码特殊蛋白的mRNＡ。 ——用ｃDNA方法获取的DNＡ片段往往是具有特定功能的目的基因 PCR技术 酶促反应大量扩增(包括分离）目的基因。 4种物质:　 （1）模板DNＡ;(２)（目的基因两条链5’端互补）DNA引物(短DＮA单链）；（3)TaｑDNA聚合酶;(4)ｄNＴP（dAＴP， ｄＴTP， ｄＧＴP和dCTP 变性：解链;退火:配对；延伸：合成 2^ｎ个 4 限制性内切酶：200多 EcｏRI特异识别ＧＡATTC及其互补碱基组成的双链片段,　 粘性末端 　 T４连接酶 载体：常用包括细菌质粒、l噬菌体、cｏsｍｉd质粒等。 检测： 酶切：利用lacＺ基因的插入失活筛选重组质粒 ｌａｃZ表达半乳糖苷酶，含ＩPTG和X-gａl,X-ｇａl被半乳糖苷酶水解成兰色， 电泳:琼脂糖凝胶电泳分离鉴定大小不等的酶解片段， 磷酸基团带负电荷 载体法转化——农杆菌介导法 基因的直接转移 高压电脉冲电激穿孔(2)基因枪法（3)微注射法 5 人胚胎干细胞包括人胚胎来源的干细胞、生殖细胞起源的干细胞和通过核移植所获得的干细胞。 用于研究的人胚胎干细胞只能通过下列方式获得： (一) 体外受精时多余的配子或囊胚; （二) 自然或自愿选择流产的胎儿细胞; 　(三） 体细胞核移植技术所获得的囊胚和单性分裂囊胚； 　（四） 自愿捐献的生殖细胞。 利用体外受精、体细胞核移植、单性复制技术或遗传修饰获得的囊胚,其体外培养期限自受精或核移植开始不得超过1４天。 6 被转移的氢原子所携带的能量储藏在新化学键中 XH2 (还原型底物）+ＮＡD+→X(氧化型底物)+NＡDH+H＋XＨ2 (还原型底物）＋ＮＡＤP+→Ｘ(氧化型底物)+NADPH+H+ XH2 (还原型底物)+ＦＡD→X(氧化型底物)+ＦADH2 还原态的ＮＡDH和ＦAＤH2等还可将所接受的电子和氢传递给其他传递体如细胞色素、辅酶Q等。 NAＤ＋: 　　 尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸,辅酶IＮAＤＰ＋：尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸，辅酶ＩIFAD： 　 黄素腺嘌呤二核苷酸 琥珀酸脱氢酶是唯一嵌入到线粒体内膜的酶 线粒体的内膜上含有电子传递链及ATP酶复合体 由葡萄糖到丙酮酸的糖酵解过程中,所有的中间产物都是以磷酸化合物的形式来实现的。 糖酵解发生在细胞质中的１0步反应，前5步为准备阶段，需要消耗2分子AＴP 来启动，后5步为产生AＴP的贮能阶段,共产出4分子ＡTP,还形成２个高能化合物NADＨ 。 糖酵解将六碳的葡萄糖分解成2个三碳的丙酮酸，净产生2个ATP，生成2分子ＮAＤH。 参与化合物是①葡萄糖,②ＡDＰ和磷酸,③ＮＡＤ＋。 需要10种酶的参与，大部分酶需要Ｍg2+作为辅助因子。 但丙酮酸需先转变成乙酰辅酶Ａ后才进入三羧酸循环 。 该循环过程中的第一个化合物为柠檬酸；循环的最后产物是草酰乙酸。 分解1分子丙酮酸形成3分子CO2、　4分子NＡDH和1分子FAＤＨ２及1分子ＡTＰ。 电子传递链又称呼吸链，主要成分是线粒体内膜上的蛋白复合物，这些复合物包含了一系列的电子传递体。 通过一系列的氧化还原反应，将高能电子从ＮADH 和ＦADＨ2最终传递给分子氧,生成水。 随着电子能量水平的逐步下降,高能电子所释放的化学能就通过磷酸化途径贮存到ATP分子中，这个过程也被称为氧化磷酸化过程。 在磷酸化过程中，相关的酶将底物分子上的磷酸基团直接转移到ＡDP分子上。 整个糖酵解中ＡTP的形成都是底物水平的磷酸化反应 在呼吸链电子传递过程中,电子从最上游的经呼吸链传递到分子氧：每分子NＡDH释放出的能量可产生２.5分子ＡＴP; 每分子的ＦＡＤH2可产生1.５分子ＡTＰ。 糖酵解:底物水平的磷酸化产生4个ATP，己糖活化消耗2个AＴP，脱氢反应产生2个NＡDＨ，经电子传递链生成3或5个ATP，净产生５或７个ATＰ; Ｋrｅbs循环：底