《发育生物学——细胞分化的分子机制》.pptVIP

珠蛋白在发育中的表达调控受位于其编码区很远的调控序列的影响 何时表达何种β-珠蛋白，决定于结合在特定珠蛋白基因的启动子上的转录因子与结合在LCR上的因子之间的亲和力。例如，敲除β -globin基因的启动子和3‘ enhancer后，成年小鼠的红细胞中仍含大量的?-globin; EKLF是β -珠蛋白启动子结合的转录因子，EKLF-/-小鼠成年之后仍表达?-和?-珠蛋白。 细胞分化中RNA加工水平上的调控 RNA加工前三个胚层中的RNA量无差异。 Ect En/mes 加工后的RNA主要存在于外胚层中。 核酸保护实验(放射性intron或exon探针与总RNA杂交后再RNase消化)表明：海胆钙结合蛋白基因CyIIIa在原肠胚的外胚层中表达 核酸run-on (在膜上固定intron序列与放射性RNA探针杂交) 实验表明：Spec1基因在原肠胚的内、中、外胚层细胞核中都表达，但成熟的Spec1 mRNA只存在于外胚层中。 同一基因的初级转录物经选择性拼接可产生不同的成熟RNA α - 原肌球蛋白 mRNA (α-tropomyosin) 细胞分化中翻译水平上的调控 mRNA寿命的调控 不同基因的mRNA的半衰期不同，主要受其3`UTR控制。短寿命mRNA的3`UTR通常含有一个或多个AU富集区，其作用是促进Poly(A)降解。 激素促进转录和增加mRNA寿命 早期发育中母体效应因子的影响 胚胎早期的发育主要由卵母细胞中的母体效应因子(maternal effect factor)所控制。 卵母细胞通过储藏的mRNA调控早期发育，直到受精后才进行翻译。 - 用转录抑制剂放线菌素D处理海胆受精卵，胚胎发育仍能进行至囊胚期 - 用蛋白质翻译抑制剂嘌呤霉素处理受精卵，受精卵停止发育。 卵母细胞中储藏性mRNA 卵母细胞中mRNA的 翻译调控机制 mRNA masking (掩蔽): mRNA与其它蛋白结合成ribonucleoprotein (RNP) complex,阻止与ribosome结合；卵成熟或受精后，离子强度改变或蛋白磷酸化等导致RNP解体，翻译得以进行。 5’ Cap(7-甲基鸟苷酸)的调控：如某些种类的moths，其卵中的部分mRNA的5`-鸟苷酸在受精后才甲基化，然后开始翻译。 卵母细胞中mRNA的 翻译调控机制 mRNA sequester: 指mRNA被阻隔于蛋白合成装置。如海胆未受精卵的histone mRNA定位于原核中，受精后原核破裂，mRNA才能进入胞质开始翻译。 翻译效率的调控：如将海胆卵母细胞裂解液的pH从自然状态下的pH6.9提高到(受精后自然状态下的) pH7.4,蛋白质合成量急剧增加。受精后pH升高的作用可能包括去除mRNA的封闭蛋白和激活翻译起始因子。 Poly(A)对翻译的调控： 在小鼠的未成熟卵母细胞质中可以翻译的mRNA具有较长的poly(A), 减数成熟分裂后poly(A)降解，翻译终止。 在减数成熟分裂前不表达的mRNA的poly(A)较短(15-90A), 但其3`UTR具有胞质多聚腺苷酸化信号序列(CPEs)(UUUUAU in mice and frogs)。减数成熟分裂后这些 mRNA迅速加上一个长的polyA,开始翻译。 poly(A)“尾巴”的获得对储藏的卵母细胞mRNA开始翻译很关键 胚胎早期的发育都由储藏在卵母细胞中的mRNA控制。 哺乳类动物胚胎在第一个细胞周期内就开始胚胎基因转录。如小鼠母体效应因子mRNA只能维持2天，以后很快降解，由胚胎基因转录的mRNA 编码新的蛋白质代替母体效应因子控制发育。 细胞分化中翻译后水平上的调控 Activation by cleaving some domains,e.g, proinsulin; Control of functions by subcellular localization, e.g., membrane proteins; Assembly with other proteins, e.g., hemoglobin; Activation by binding to ions, e.g., calmodulin; Activation by modifications, e.g., phosphorylation. 程序化细胞死亡受遗传调控 Programmed cell death (apoptosis) in normal part of development, e.g. in the morphogenesis of the vertebrate limb, the interdigital cell death i