蛋白研究技术.pptxVIP

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蛋白研究技术;1、从DNA到蛋白质,存在3个层次调控,转录水平,翻译水平,翻译后水平,基因只能解释转录水平,其余不能解释。 2、蛋白作为生命活动的最终体现者,具有自身的特点,如翻译修饰,构象变化,亚细胞定位或迁移、蛋白间的相互作用等,基因不能解释; 3、基因组数目稳定,研究内容有限(32亿个碱基对); 蛋白组数目不稳定,研究内容无限;;3;蛋白质组学和基因组学研究互补与互助;蛋白质组学研究内容;6;7;8;9;10;11;芯片特征——细胞因子相对对定量(Raybiotech);芯片特征——悬浮芯片(Bio-Plex);14;15;16;17;18;19;20;21;22;23;24;25;26;27;28;29;30;31;iTRAQ优缺点分析;33;34;35;36;37;38;39;试剂类型;41;分泌蛋白质(细菌)的样品制备;43;4.质谱鉴定前蛋白质样品处理;一是双向凝胶电泳蛋白样品处理 进行可溶性蛋白的分离圈,所以处理方法的改进可以提高样品的溶解度,去除非蛋白类杂质的干扰,最大程度还原样品的真实状态,增加试验结果的可靠性。 二是质谱蛋白样品处理 用于鉴定蛋白样品,对蛋白质的纯度要求较高,样品处理后可达到鉴定的敏感性和可靠性。 由于蛋白质数量多、化学结构和性质各异、样品组分复杂,经过近30多年的发展蛋白质组学仍处于初级阶段,样品处理至今没有统一的标准。一些特殊蛋白质,如膜蛋白,极性蛋白,高分子量和低分子量蛋白等还有待进一步的研究。此外,细胞器内蛋白质、磷脂肽、糖化蛋白等与信号通路相关的蛋白质将会成为研究的热点,势必会对蛋白质组学样品处理技术提出新挑战;动物组织样品的制备;植物组织样品的制备;细胞样品制备;细胞破碎方法;50;样品制备原则;52;后期验证;54;55;56;57;58;59;60;61;62;63;64;65;66;67;68;69;70;71;72;73;74;75;;77;数据库或软件推荐;

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