核糖体沉降系数.pdfVIP

沉降系数（sedimentation coefficient ）用离心法时，大分子沉降速度的量度，等于每 单位离心场的速度。或 s=v/ω2r 。s 是沉降系数，ω 是离心转子的角速度（弧度/秒），r 是到 旋转中心的距离，v 是沉降速度。沉降系数以每单位重力的沉降时间表示，并且通常为1～ 200×10-13秒范围，10-13这个因子叫做沉降单位 s，即1s=10-13秒，如血红蛋白的沉降系 数约为4×10-13秒或4s 。大多数蛋白质和核酸的沉降系数在4s 和40s 之间，核糖体及其亚基 在30s 和80s 之间，多核糖体在100s 以上。 核糖体（Ribosome），是核糖核酸蛋白体的简称。是细胞器的一种，为椭球形的粒状 小体，原核与真核细胞蛋白质合成的部位。70S 核糖体是核糖体的一种。 沉降系数 根据在超速离心机的离心时的沉降系数，原核生物的核糖体为70S。数字代表沉降系数 值，数值越大核糖体也就越大。 亚基分述 70S 核糖体由30S 和50S 两个亚基组成。 30S 亚基含有一个16S rRNA 分子和21种不同蛋白质。 50S 亚基含有一个5S rRNA，以及32种不同蛋白质。 70S 核糖体并不只存在于原核生物细胞内。真核生物的线粒体、叶绿体和细胞核也有 各自的核糖体，它们的沉降系数均为70S。因此，可以依据70S 核糖体的存在来判别原核生 物。 　质粒 　　质粒是染色体外能够进行自主复制的遗传单位，包括真核生物的细胞器和细菌细胞中染 色体以外的脱氧核糖核酸(DNA)分子。现在习惯上用来专指细菌、酵母菌和放线菌等生物中 染色体以外的 DNA 分子。在基因工程中质粒常被用做基因的载体。 　　目前，已发现有质粒的细菌有几百种，已知的绝大多数的细菌质粒都是闭合环状 DNA 分子(简称 cccDNA) 。细菌质粒的相对分子质量一般较小，约为细菌染色体的0.5%～3% 。 根据相对分子质量的大小，大致上可以把质粒分成大小两类：较大一类的相对分子质量是 40×106以上，较小一类的相对分子质量是10×106以下(少数质粒的相对分子质量介于两者之 间)。每个细胞中的质粒数主要决定于质粒本身的复制特性。按照复制性质，可以把质粒分 为两类：一类是严紧型质粒，当细胞染色体复制一次时，质粒也复制一次，每个细胞内只有 1～2个质粒；另一类是松弛型质粒，当染色体复制停止后仍然能继续复制，每一个细胞内 一般有20个左右质粒。一般分子量较大的质粒属严紧型。分子量较小的质粒属松弛型。质 粒的复制有时和它们的宿主细胞有关，某些质粒在大肠杆菌内的复制属严紧型，而在变形杆 菌内则属松弛型。 　　在基因工程中，常用人工构建的质粒作为载体。人工构建的质粒可以集多种有用的特征 于一体，如含多种单一酶切位点、抗生素耐药性等。常用的人工质粒运载体有 pBR322、 pSC101。pBR322含有抗四环素基因(Tcr)和抗氨苄青霉素基因(Apr)，并含有5种内切酶的 单一切点。如果将 DNA 片段插入 EcoRI 切点，不会影响两个抗生素基因的表达。但是如果 将 DNA 片段插入到 Hind III、Bam H I 或 Sal I 切点，就会使抗四环素基因失活。这时，含 有 DNA 插入片段的 pBR322将使宿主细菌抗氨苄青霉素，但对四环素敏感。没有 DNA 插 入片段的 pBR322会使宿主细菌既抗氨苄青霉素又抗四环素，而没有 pBR322质粒的细菌将 对氨苄青霉素和四环素都敏感。pSC101与 pBR322相似，只是没有抗氨苄青霉素基因和 PstI 切点。质粒运载体的最大插入片段约为10 kb(kb 表示为千碱基对)。 以高中生物角度来看，质粒是游离在细胞质基质中的环状 DNA，主 要存在于细菌等原核生物中，负责某些蛋白质与激素、抗生素等的分 泌。而叶绿体从结构上看比质粒要复杂得多，虽然叶绿体的 DNA 也 是环状结构，但毕竟叶绿体不只有 DNA，还有双层膜，其中还有70S 核糖体，多种与光合作用 DNA 复制等基础生命活动有关的酶，远远 比质粒复杂。因此叶绿体不能算做质粒。 线粒体与叶绿体是一样的道理，自然也不能算做的质粒。 首先，质粒是游离在细胞质基质中的环状 DNA ，主要存在于细菌等原核生物中，是携带某 些抗生素、抗药性以及一些蛋白的基因。 线粒体和叶绿体是半自主性细胞器 半自主性细胞器的概念：自身含有遗传表达系统( 自主性)；但编码的遗传信息十分有限，其 RNA 转录、蛋白质翻译、自身构建和功能发挥等必须依赖核基因组编码的遗传信息( 自主性 有限)。 很多学者把线粒体和叶绿体的