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GnRHa对 SD大鼠子宫内膜容受性的影响 目的 : 体外受精 - 胚胎移植 (in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET) 中, 优质的胚胎、接受态子宫内膜和胚胎与内膜发育的同步发 育是胚胎成功种植的关键。 冻融胚胎移植周期中 , 在胚胎质量一定的情况下 , 改善 子宫内膜容受性 , 能改善胚胎种植结局。 目前常用的子宫内膜准备方案主要有自然周期、 诱导排卵周期及激素替代周 期。近年来的研究提示 , 促性腺激素释放激素 (gonadotrophin releasing hormone,Gn RH)不仅合成于中枢神经系统 , 通过下丘脑 - 垂体 - 性腺轴 (hypothalamus-pituitary-ovary axis,HPO) 作用于卵巢及子宫 , 在卵巢、子宫等 外周生殖系统也有合成 , 促性腺激素释放激素受体 (gonadotrophin releasing hormone,Gn RHR)在卵巢颗粒细胞及子宫上皮和基质细胞表达也很丰富 , 其在子 宫内膜的表达在黄体期升高 ,Gn RH可能从多个层面调节生殖活动 , 改善子宫内膜 容受性。 子宫内膜腺体在胚胎种植过程中发挥着重要作用 , 白血病抑制因子 (leukemia inhibitory factor,LIF) 是目前公认的子宫内膜容受性的标志物之一 , 胞饮突被认为是子宫内膜容受性经典的形态学标志 , 它们的出现与子宫内膜的 “种植窗期”相吻合 , 子宫内膜腺体在胚胎种植过程中发挥着重要作用。本研究 利用雌 (E) 、孕激素 (P) 及促性腺激素释放激素激动剂 (Gn RHa)建立 SD大鼠 (Spparague-Dawley rats) 子宫内膜准备方案模型。 分析各方案中大鼠子宫内膜腺体数目、腺体总面积、 LIF 表达水平及胞饮突 的表达 , 研究 Gn RHa对 SD大鼠子宫内膜容受性的影响。方法 :1 SD 大鼠一般状 况评估自入组开始 , 密切观察大鼠活动情况 , 有无活动增多、 躁动、进食量减少等 低雌激素症状。 每 4 天称量大鼠体重 , 分析大鼠体重变化 , 计算大鼠进食量。 2 不同方案内膜 准备方法 SD大鼠模型的建立实验动物为雌性未孕 SD大鼠 , 每日上午 9:00 行阴道 细胞涂片检查确定大鼠生殖周期 , 超声检测大鼠子宫内膜厚度 , 连续观察 2 周期。 60 只有正常生殖周期的大鼠 , 随机分为四组 , 自然周期组 (nature cycle group,NC group) 、人工周期组 (hormone replacement therapy group,HRT group) 、 高剂量 Gn RHa降调节联合人工周期组 (high-dose Gn RHa and hormone replacement therapy group,HDG-HRT group) 、低剂量 Gn RHa降调节联合人工 周期组 (low-dose Gn RHa and hormone replacement therapy group,LDG-HRT group), 每组 15 只, 各组大鼠周龄及体重无差别。自然周期组大鼠肌肉注射无菌 注射用水 0.2m L,28 天后查阴道细胞涂片 , 动情期与雄鼠合笼 , 次晨检出现阴道栓 或者记为孕 0 天 ; 人工周期组大鼠肌肉注射无菌注射用水 0.2m L,28 天后每日给 予补佳乐 0.42mg/kg 灌胃 , 超声监测大鼠子宫内膜厚度 , 达到自然周期中动情期 大鼠子宫内膜厚度的平均值 2.82mm、阴道细胞涂片表现为全部为无核角化上皮 或间有少量上皮细胞时与成年雄鼠合笼 , 次晨检测到阴道栓者记为孕 0 天 , 同时 加用黄体酮 6mg/kg 肌注 ; 高剂量降调节联合人工周期组、 低剂量降调节联合人工 周期组于动情间期给予达菲林 0.4mg/kg 、0.2mg/kg 肌肉注射 , 给药 28 天开始给 予补佳乐 0.42mg/kg 灌胃 , 超声监测子宫内膜厚度 , 根据内膜厚度及阴道细胞学 涂片情况调节补佳乐用药时间 , 内膜厚度达到自然周期中动情期大鼠子宫内膜厚 度的平均值 2.82mm、阴道细胞涂片表现为全部为无核角化上皮或间有少量上皮 细胞时加用黄体酮 6mg/kg 肌注 , 并与雄鼠交配 , 晨起检出阴道栓者记孕 0 天, 各组 大鼠均于孕 4 天处死大鼠并取子宫。 3 不同内膜准备方案 SD大鼠子宫内膜厚度的超声测量运用 Philips IU 22 多普勒超声仪检测大鼠子宫内膜厚度 , 使用 30MHZ高频电子线阵探头进行检测 , 测量双侧子宫内膜最厚的位置的厚度 , 并取平均值。超声检查大鼠子宫内膜厚度 的时机为 :