靛酚蓝比色法测定土壤氮.docVIP

靛酚蓝比色法测定土壤铵态氮 提取方法：取新鲜土样10.0g，放入100mL三角瓶中，加入2mol??L-1 KCL溶液50.0mL。用橡皮塞塞紧，振荡30min，立即过滤于50mL三角瓶中（若土壤NH4+—N含量低，可将液土比改为2.5:1） A 试剂： 复合液：28g NaOH、5g Na2EDTA·2H2O和50g 酒石酸钾钠溶于1L去离子水中，保存于棕色瓶中。 催化液：150g 水杨酸钠和0.3g硝普钠溶于1L去离子水中，保存于棕色瓶中。 显色液：200g NaOH和250g 苯酚定容至1L，保存于棕色瓶中。 混合液：催化液和显色液1:1混合，用前进行配制。 次氯酸溶液：60mL 5.25% 次氯酸钠溶液稀释至1L，保存于棕色瓶中。 氮标准溶液： 2.5 mg NH4+-N/mL储备液：11.79g (NH4)2SO4定容至1L。 10μg NH4+-N/mL 工作溶液：吸收1mL储备液，稀释至250mL. B 步骤 打开分光光度计，预热30min； 吸取2mL样品液加入10mL容量瓶或刻度试管中； 吸取0，0.1，0.2，0.4，0.6和0.7mL工作溶液加入10mL容量瓶中，铵离子的浓度分别为0.0，0.1，0.2，0.4，0.6和0.7μg/mL。若超过0.8μg/mL，则不成线性关系； 加入5滴0.25%正硝基酚； 用5N NaOH中和。在碱性条件下，溶液显黄色； 加入1mL 复合液和1mL 混合液，摇匀； 加入1mL 次氯酸溶液，摇匀； 稀释至10mL，室温放置60min后，在626nm处比色； 绘制工作曲线，并寻找样品氮浓度。 C 计算： 含氮率（mg/kg）=(C×Vs)/Ws C：标准曲线上查得的铵浓度（μg/mL） Vs：样本溶液总体积(mL) Ws：样本重量。 紫外分光光度法测定硝态氮 提取方法：取新鲜土样25g，放入250mL三角瓶中，加入CaSO4?2H2O 0.25g和125mL水，盖塞后，用振荡机振荡10min。放置5min后，将悬液的上部清夜用干滤纸过滤，澄清的滤液收集在干燥洁净的三角瓶中。(若滤液因有机质呈现颜色，可加活性炭除之) 试剂 氮标准贮存溶液[ρ(N)=100mg L-1]，称取0.7218g硝酸钾(KNO3，分析纯)，溶于水中，转入1000mL容量瓶中，定容摇匀。 氮标准溶液[ρ(N)=10mg.L-1]：将氮标准贮存溶液准确稀释10倍。 2.操作步骤 工作曲线 吸取氮标准溶液0mL、1mL、2mL、3mL、4mL、5mL、6mL分别于50mL比色管中，用水定容至刻度，得到氮的标准系列溶液0mg L-1、0.2mg L-1、0.4mg L-1、0.6mg L-1、0.8mg L-1、1.0mg L-1、1.2mg L-1，测定A220和A275。以A(A=A220-A275)为纵坐标，氮的浓度为横坐标绘制工作曲线。 直接吸收样品溶液测定A220和A275，根据样品A值(A=A220-A275)查得测定液的浓度。 3.结果计算 ρ(N)=ρV/W ρ(N)-样品中总氮含量， mg kg-1； ρ-从工作曲线上查得氮浓度mg L-1； V-提取液体积，mL； W-样品重量，g 注意：两测定方法中，标准溶液的配制均应用提取土壤的溶液进行配制。