食品微生物检验技术 检验基本技术 食品微生物检验技术模块1-2-1无菌操作技术.pptxVIP

食品微生物检验技术;;子模块 1.2;无菌操作技术;无菌操作技术;无菌操作技术;无菌操作技术;无菌操作技术;一、无菌室 无菌室一般为4 ~5 平方米、高 2.5 米的独立小房间（与外间隔离），专辟于微生物实验室内，可以用板材和玻璃建造。无菌室外要设一个缓冲间，错开门向，以免气流带进杂菌。无菌室和缓冲间都必须密闭、室内装备的换气设备必须有空气过滤装置。 无菌室每日（使用前）紫外线照射（1~2小时），每周用甲醛、乳酸、过氧乙酸熏蒸（2小时），每月用新洁尔灭擦拭地面和墙壁一次的方式进行消毒。;二、超净工作台 超净台的使用与保养： （1）风速保持在0.32-0.48米/秒； （2）使用前开启紫外灯照射30分钟以上； （3）让超净台预工作10－15分钟； （4）使用完毕后，用70%酒精将台面和台内四周擦拭干净。 ;;四、消毒器材： 无菌室内的凳子、试管架、天平、工作台、手等 ;无菌操作技术;灭菌和消毒 消毒：是指应用消毒剂等方法杀灭物体表面和内部的病原菌营养体的方法。 灭菌：是指用物理和化学方法杀死物体表面和内部的所有微生物，使之呈无菌状态。 ;灭菌和消毒－－物理方法 温度 ：利用温度进行灭菌、消毒或防腐，是最常用而又方便有效的方法。高温可使微生物细胞内的蛋白质和酶类发生变性而失活，从而起灭菌作用，低温通常起抑菌作用。 ;灭菌和消毒－－物理方法 干热灭菌法 a.灼烧灭菌法：利用火焰直接把微生物烧死。此法彻底可靠，灭菌迅速，但易焚毁物品，所以使用范围有限，只适合于接种针、环、试管口及不能用的污染物品或实验动物的尸体等的灭菌。 b.干热空气灭菌法：这是实验室中常用的一种方法，即把待灭菌的物品均匀地放入烘箱中，升温至160°C，恒温1小时即可。此法适用于玻璃皿、金属用具等的灭菌。;灭菌和消毒－－物理方法 湿热灭菌法 a.巴氏消毒法：有些食物会因高温破坏营养成分或影响质量，如牛奶、酱油、啤酒等，所以只能用较低的温度来杀死其中的病原微生物，这样既保持食物的营养和风味，又进行了消毒，保证了食品卫生。该法一般在62°C，30分钟既可达到消毒目的。此法为法国微生物学家巴斯德???创，故名为巴氏消毒法。 b.煮沸消毒法：直接将要消毒的物品放入清水中，煮沸15分钟，即可杀死细菌的全部营养和部分芽孢。若在清水中加入1%碳酸钠或2%的石炭酸，则效果更好。此法适用于注射器、毛巾及解剖用具的消毒。 ;灭菌和消毒－－物理方法 湿热灭菌法 c.间歇灭菌法：上述两种方法在常压下，只能起到消毒作用，而很难做到完全无菌。若采用间歇灭菌的方法，就能杀灭物品中所有的微生物。具体做法是：将待灭菌的物品加热至100°C，15~30分钟，杀死其中的营养体。然后冷却，放入37°C恒温箱中过夜，让残留的芽孢萌发成营养体。第2天再重复上述步骤，三次左右，就可达到灭菌的目的。此法不需加压灭菌锅，适于推广，但操作麻烦，所需时间长。 ;灭菌和消毒－－物理方法 湿热灭菌法 d. 加压蒸汽灭菌法：把待灭菌的物品放在一个可密闭的加压蒸汽灭菌锅中进行的，以大量蒸汽使其中压力升高。由于蒸汽压的上升，水的沸点也随之提高。在蒸汽压达到1.055公斤/厘米2时，加压蒸汽灭菌锅内的温度可达到121°C。在这种情况下，微生物（包括芽孢）在15~20分钟便会被杀死，而达到灭菌目的。如灭菌的对象是砂土、石蜡油等面积大、含菌多、传热差的物品，则应适当延长灭菌时间。;灭菌和消毒－－物理方法 在同样的温度下，湿热灭菌的效果比干热灭菌好，这是因为： 一方面细胞内蛋白质含水量高，容易变性。 另一方面高温水蒸汽对蛋白质有高度的穿透力，从而加速蛋白质变性而迅速死亡。 ;灭菌和消毒－－物理方法 辐射 利用辐射进行灭菌消毒，可以避免高温灭菌或化学药剂消毒的缺点，所以应用越来越广，目前主要应用在以下几个方面： １）接种室、手术室、食品、药物包装室常应用紫外线杀菌。 ２）应用β射线作食品表面杀菌，γ射线用于食品内部杀菌。经辐射后的食品，因大量微生物被杀灭，再用冷冻保藏，可使保存期延长。;灭菌和消毒－－物理方法 过滤 采用机械方法，设计一种滤孔比细菌还小的筛子，做成各种过滤器。通过过滤，只让液体培养基从筛子中流下，而把各种微生物菌体留在筛子上面，从而达到除菌的目的。 这种灭菌方法适用于一些对热不稳定的体积小的液体培养基的灭菌以及气体的灭菌。它的最大优点是不破坏培养基中各种物质的化学成分。但是比细菌还小的病毒仍然能留在液体培养基内，有时会给实验带来一定的麻烦。;灭菌和消毒－－化学方法 一般化学药剂无法杀死所有的微生物，而只能杀死其中的病原微生物，所以是起消毒剂的作用，而不是灭菌剂。 能迅速杀灭病原微生物的药物，称为消毒剂。能抑制或阻止微生物生长繁殖