抗肿瘤诊疗前药以及双识别位点荧光探针的设计、合成以及生物应用.pdfVIP

摘要 摘要 生物硫醇，包括半胱氨酸 (Cys)、同型半胱氨酸 (Hcy)、谷胱甘肽 (GSH) 和 硫化氢 (H S)，在人体生理和病理过程中起着至关重要的作用。这些生物硫醇的 2 异常水平与多种疾病有关，如帕金森氏病、癌症、阿尔兹海默症、艾滋病、肝 损伤、心血管疾病和神经退行性疾病等。 次氯酸 (HC1O) 是通过髓过氧化物酶 (MPO) 催化氯离子 (C1) 和过氧化- 氢 (H O ) 之间的反应产生的。次氯酸对人体免疫防御系统非常重要，并且次氯 2 2 酸异常水平与多种疾病密切相关，例如心血管疾病、神经退行性疾病、肺损伤、 关节炎、风湿病甚至癌症等。因此生物硫醇和次氯酸的荧光探针受到越来越多 人的广泛关注。本论文提出了一种抗肿瘤诊疗前药以及两种双识别位点荧光探 针。 1、基于二氰基异佛尔酮设计合成了一种检测Cys 的抗肿瘤诊疗前药 T1-O-Drug。该前药由几个功能部分组成，包括作为荧光报告基团 (T1-OH)、 (Drug) Cys ( ) 抗癌药物的喜树碱 、 触发的可裂解的连接基团 二硫键连接基 。对 其光物理性质研究表明，向前药T1-O-Drug 加入Cys 后，在435nm 处 (Drug 荧光) 以及588nm 处 (T1-OH 荧光) 出现显著的荧光增强。 2 4- 4- -7- -1,2,3- 、通过 羟基苄胺连接亚甲基蓝衍生物和 氯 硝基 苯并噁二唑 (NBD-Cl) 设计合成了一种新型的双识别位点荧光探针FDOCl-N-NBD，用于分 别检测Hcy 和HOCl。此外，通过间苯二酚连接的亚甲基蓝衍生物和NBD-Cl 合 成了参比物FDOCl-O-NBD，并发现参比物FDOCl-O-NBD 难以释放出亚甲基 蓝。此外，探针FDOCl-N-NBD 具有稳定性好、检测限低 (Hyc:51.4nM,HOCl: 2.16μM)、快速响应 (Hyc:280s,HOCl:140s)、选择性高和抗干扰性强等优点， Hcy HOCl HOCl Hcy 并且该探针可以连续识别 和 或 和 。该探针已经成功应用于 U87MG、MDA-MB-231 和Huh7 细胞中检测内源性Hcy 和HOCl。 3、通过乙二胺或1,2-双(2-氨基乙氧基)-乙烷连接亚甲基蓝衍生物和4-溴-1,8- FDOCl-N -1 FDOCl-N -2 萘二甲酸酐合成了两种新的双识别位点荧光探针 3 和 3 ， 用于H S和HOCl 的检测和生物成像。其中FDOCl-N -1 具有比FDOCl-N -2 更 2 3 3 加优异的光物理性质，如荧光强度变化更加明显和检测限更低。探针FDOCl-N -1 3 I 摘要 可以快速、高选择和高灵敏度地检测H S和HOCl，并且该探针可以依次识别 2 H S HOCl HOCl H S 和 或 和 。 2 2 关键词：半胱氨酸；诊疗前药；同型半胱氨酸；次氯酸；硫化氢；双识别位点； 荧光探针