有氧运动对AD小鼠前额叶皮层Ras-ERK-bcl2_bax通路及学习记忆的影响.pdfVIP

沈阳体育学院硕士学位论文 摘 要 摘 要 目的：研究8周有氧运动能否通过影响AD 模型小鼠前额叶皮层Ras-ERK-Bcl2/Bax 通 路，减少神经细胞凋亡，提高其认知和学习记忆能力。 方法：健康的雄性12 周C57BL/6J 小鼠48 只随机分为对照组 （C 组）、模型组 （M 组） 和运动模型组 （E 组），每组16 只。C 组每日腹腔注射0.9%氯化钠；M 组每日腹腔注 D- (80mg/kg/day) (5mg/kg/day) 8 AD E 射 半乳糖 和三氯化铝 ，持续 周，造成 模型； 组按 M 组造模同时进行跑台运动，5 次/周，60min/次，先以15m/min 的速度运动10min，再 以18m/min 的速度运动40min，后以15m/min 的速度运动 10min。8周运动与造模结束 Y Morris 后，用 迷宫与 水迷宫，检测各组小鼠行为学指标；对前额叶皮层组织切片进 行HE 染色和尼氏染色，分别观察前额叶皮层细胞形态和神经元凋亡情况；使用免疫组 化和Western Blot 方法检测前额叶皮层中Ras、Raf、MEK、ERK1/2、p-ERK1/2、bcl-2、 bax 蛋白表达水平。 结果：1.行为学观察：Y 迷宫实验，M 组与C 组相比交替反应率显著降低 （P0.01）， E 组与M 组相比交替反应率升高极其显著 （P0.01）；Morris水迷宫，空间探索实验发 M C (P0.01) E 现 组与 组相比较，潜伏期时间第三天、第四天、第五天升高明显 ； 组与 M 组比较发现潜伏期第二天降低(P0.05)，第三天、第四天、第五天均降低(P0.01)。定 位航行实验发现，M 组与C 组相比小鼠空间探索实验穿越平台次数降低 （P0.01），E M P0.05 组与 组相比穿越平台次数升高显著 （ ）。 2.HE 染色观察脑前额叶皮层形态学发现，C 组前额叶细胞饱满、胞核清晰；M 组与C 组相比，细胞形态出现异常，出现核固缩现象，正常细胞数量降低极其显著 （P0.01）； E M P0.05 组与 组相比，核固缩现象减少，形态趋于正常，正常细胞数量显著升高 （ ）。 尼氏染色观察脑前额叶皮层神经元细胞发现，C 组小鼠神经元细胞及颗粒细胞，形态完 整，胞浆内尼氏小体丰富；M 组部分胞质自溶，尼氏小体明显减少；E 组神经元丢失、 M 变性情况较 组有明显改善，神经元细胞结构较完整。 3.免疫组化和Western Blot 分子测试分析，M 组与C 组相比Ras、Raf表达降低极其显著 （P0.01）；E 组与M 组相比Ras升高极其显著（P0.01），Raf表达升高显著（P0.05）， MEK P0.05 M C p-ERK1/2 各组间比较 表达变化不明显 （ ）。 组与 组相比 表达极显著 降低（P0.01）；E 组与M 组相比p-ERK1/2 表达显著升高（P0.05），各组间比较ERK1/2 表达没有显著差异（P0.05）。Western Blot 法检测Bcl-2/Bax 的表达，M 组与C 组相比， bcl-2 P0.01 Bax P0.01 E M 表达极显著降低 （ ）， 表达升高极其显著 （ ）。 组与 组相比