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液相色谱基础知识 2017年04月11日  一、什么是色谱 ≯色谱是一种分离工具,而不是传统意义上的分析 仪器。 啼色谱法也叫层析法,它是一种高效能的物理分离技 术,将它用于分析化学并配合适当的检测手段,就 成为色谱分析法。 →常见的分离方法 蒸馏、离心、电泳、过滤、超滤、等等 →色谱法的发明人 俄国科学家: 麦克海尔.塞蒙诺维奇.维茨特 M. S. Tswett  二、什么是液相色谱呢 液相色谱 HPLc液石日E 相 柱色谱 薄层色谱 纸色谱  三、什么是高效液相色谱 High Performance Liquid Chromatography 高效液相色谱法,简称:HPLC →是一种区别于经典液相色谱;基于仪器方 法的高效能分离手段 ≯具有高性能的色谱柱,高精度、耐高压的 输液泵以及高灵敏度的检测器。  HPLc的分离原理、仪器配制和工作流程 分离原理匚 请单击 动画演示 HPLC色谱柱 数据处理系统 进样器 溶剂 ●● 色谱泵■ 检测器[ 废液  四、高效液相色谱法的特点 高一广一快” ≯①高压:对载液加高,流动相能迅速通过色谱柱压. →②高效:分离效能高 →③高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在 uL数量级。 ④应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可 用高效液相色谱分析 ⑤分析速度快:较经典液体色谱法速度快得多, 通常分析一个样品在15-30分钟,有些样品甚至 5分钟内即可完成,一般小于1小时  五、高效液相色谱法的主要类型及原理 啼1、液液分配色谱Y 2、液-固吸附色谱￥ →3、离子交换色谱 →4、离子对色谱 5、离子色谱 6、排阻色谱 7、亲和色谱(AC)  1、液液分配色谱 →固定相与流动相均为液体(互不相溶) 基本原理:组分在固定相和流动相上的分配; 峥流动相:对于亲水性固定液,采用疏水性流动相 流动相的极性小 定液的极性(正相 normal phase),反之,流动相的极性大于固定液的极 姓(反相 reverse phase)。正相与反相的出峰顺 序相反 固定相:早期涂渍固定液,固定液流失,较少采 啼化学键介園定相x将夆种不同甚团遭过化学区座 反相柱)以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂  反相高效液相色谱法 →即指流动相的极性大于固定相极性的色谱 方法。 →在本法中常采用化学键合相作为固定相, 流动相采用水一甲醇或水—乙腈系统,在 反相色谱中,极性强的组分在分离时先流 出柱子,极性弱的组分后流出。因此适合 于共存组分极性差异较大的样品分析。  乙腈 Ging) 啼乙腈又名甲基氰,分子式CHCN,无色透 明液体,密度小于水,约为079,能与水和 乙醇等有机溶剂以任意比混溶,易燃,有 毒性