分子生物学-13-3-第七章原核基因表达调控-Trp.docVIP

PAGE 郜刚分子生物学教案 教学单元教案格式 第8章 基因表达调控 课程教案 授课题目：8.2 原核基因表达调控—弱化子模型与其他水平的调控 教学时数： 1 授课类型： eq \o\ac(□,√) 理论课 □ 实践课 教学目的、要求： 进一步巩固基因表达调控的基本概念 原核基因调控机制的另外一种重要模型：弱化子机制（掌握） 色氨酸纵子（重点掌握） 其他水平的调控机制（了解） 教学重点： 重点阐明：色氨酸操纵子的结构、机制、功能、意义 重点指出：原核生物基因表达调控的经济原则 教学难点： 绝对难点：弱化子的机制，以及与乳糖操纵子的区别 相对难点：无 教学方法和手段： 老师讲授为主：讲授 视频演示 PPT演示 讨论。以电脑幻灯片边演示边讲述为主，（白板课件）辅以板书（黑板板书） 学生回答问题为辅：（如时间等条件许可的情况下） 注：以下内容按实际需要进行取舍 要求有多媒体，因为信息量大，许多结构图需要媒体放映，效果才好 教学内容与教学设计： 教学设计 先复习常见的操纵子结构，以乳糖操纵子为代表，理解原核生物基因表达调控的特点：多顺反子、转录与翻译偶联，负控制居多。随后指出细菌中常有更为精细的控制，引出本节主要内容：弱化子。进一步了解基因表达调控是一个非常复杂的过程，控制转录的开始是最为经济有效的。 教学导入 复习乳糖操纵子) 8.2.2转录起始后的调控弱化子 定义：原核生物中发现的位于转录单位开始区的一种内部终止子 特点：是通过外部因子（如核糖体）来控制内部终止子是否形成发夹结构来实现终止的： 如果形成发夹结构就阻止了RNA聚合酶对整个结构基因的转录，起到弱化一次转录的作用，如果不形成发夹结构，就不能阻止RNA聚合酶对整个结构基因的转录，基因得到表达，控制RNA二级结构的是由核糖体在mRNA上的位置所决定的。 色氨酸操纵子是一个典型的弱化子例子 弱化子最早是在大肠杆菌色氨酸操纵子中发现的。 色氨酸操纵子具有5个结构基因，编码分枝酸转化为色氨酸的酶。 色氨酸操纵子就是控制细胞中色氨酸合成的。 8.2.2.3弱化子与前导肽 Trp operon 特征 特点（兼与Lac operon比较）: (1) 阻遏物trpR和trpABCDE不连锁； (2) 操作位点位于在启动子内 (3)启动子和结构基因不直接相连，二者被前导序列(Leader)和弱化子(attenuator) 所隔开 (4)最大的区别是：Trp既有阻遏调控，又有弱化调控 trp操纵子的阻遏调控 高Trp时：阻遏物 + Trp，结合操纵子，Trp operon不表达 低Trp时：阻遏物不结合操纵子，Trp operon表达; Trp operon 弱化调控机制 8.2.2.4 阻遏作用与弱化作用的协调 高浓度色氨酸：采用完全阻遏机制，基因不转录 低浓度色氨酸：阻遏解除，基因能转录，但是采用了弱化机制， 没有色氨酸表达了 两个调控系统，避免浪费提高效率； 阻遏系统 高水平trp时，不转录 低水平trp时，转录至前导序列 弱化系统 细调 为什么需要阻遏体系？ 当大量Trp 存在时，阻遏系统起作用。阻遏蛋白与之结合，阻止先导mRNA合成。 为什么需要弱化系统？ 当trp浓度低时，阻抑蛋白从有活性变为无活性，速度极慢，不能很快引发trp 合成。因此需要一个能快速作出反应的系统，以保持培养基中适当的Trp水平。 原核生物细致的精细调控机制，增强原核生物对环境的适应性 转录的弱化作用的本质 mRNA转录的终止是通过前导肽基因的翻译来调节的。 在前导肽基因中有两个相邻的色氨酸密码子，故这个前导肽的翻译必定对tRNATrp 的浓度敏感。 补充：mRNA前导区的序列分析 前导区mRNA上有两个连续的色氨酸密码子；前导序列上有4个分别以1、2、3、4表示的片断能以两种不同的方式进行碱基配对，有时以1－2和3－4配对，有时只以2－3方式互补配对。 细菌中为什么要有弱化子系统呢？ 一般认为弱化子系统主要是对外源色氨酸浓度做出反应。外源色氨酸浓度很低的信号虽然足以引起trp操纵子的去阻遏作用，但是这个信号还不足以很快引发内源色氨酸的合成，因为阻遏蛋白从无活性向有活性的转变速度较慢。在这种环境下，弱化子就通过抗终止的方法来增加trp基因表达，从而提高内源色氨酸浓度。 那么为什么还要有阻遏体系呢？ 目前认为阻遏物的作用是当有大量外源色氨酸存在时，阻止非必需的先导mRNA的合成，它使这个合成系统更加经济。 弱化（衰减）作用的特点 是外部事件(核糖体翻译)控制内部终止所需要的发夹结构的形成。另外很重要的一个方面是转录和翻译过程是前后相连（closel