- 1、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
- 5、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
mRNA 阻遏蛋白 有乳糖存在时 I DNA Z Y A O P pol 启动转录 mRNA 乳糖 半乳糖 β - 半乳糖苷酶 其他调节序列、调节蛋白 激活蛋白 (activator) 可结合启动序列邻近 的 DNA 序列,促进 RNA 聚合酶与启动序列的 结合,增强 RNA 聚合酶活性 。 有些基因在没有激活蛋白存在时, RNA 聚合酶很少或完全不能结合启动序列。 第三节 基因转移与重组 ? 外源性遗传物质由供体菌转入某受体 菌细胞内的过程,称为基因转移。 ? 转移的基因与受体菌 DNA 整合在一起, 称为重组( recombination) 。 基因转移和重组的方式 类型 基因来源 转移方式 转化 供菌 受菌摄入 接合 供菌 通过性菌毛 转导 供菌 噬菌体媒介 溶原性转换 噬菌体 前噬菌体 1. 转化( transformation ) 供体菌游离的 DNA 片段直接 进入受体菌 , 使受体菌获得 新的遗传性状 , 称为 转化 . ? 典型试验 — 1928 年, Griffith 发现肺炎链球菌( S. pneumoniae )的转化现象 , 目前 已知有二十多个种的细菌具有 自然转化的能力。 1 、建立了感受态的受体细胞 感受态细胞: 具有摄取外源 DNA 能力的细胞 自然感受态 的出现是细胞一定生长阶段的生理特性, 受细菌自身的基因控制; 人工感受态 则是通过人为诱导的方法,使细胞具有摄 取 DNA 的能力,或人为地将 DNA 导入细胞内 2 、外源游离 DNA 分子(转化因子) 进行自然转化,需要二方面必要的条件: 供体菌 受体菌 DNA 片段 Bacterial Transformation With DNA Fragments 人工转化: ? 在自然转化的基础上发展和建立的一项细菌基因重组 手段,是基因工程的奠基石和基础技术。 ? 不是由细菌自身的基因所控制; ? 用多种不同的技术处理受体细胞,使其人为地处于一 种可以摄取外源 DNA 的“人工感受态”。 ? 用 CaCl2 处理细胞、电穿孔法等是常用的人工转化手 段。 噬菌体 DNA 被感受态细胞摄取并产生有活性的病毒颗粒 转染 (transfection) : 转染的特点:提纯的噬菌体 DNA 以转化的(而非感染)途径 进入细胞并表达后产生完整的病毒颗粒。 转化过程的特点: a )对核酸酶敏感; b )不需要活的 DNA 供体细胞; c )转化是否成功及转化效率的高低主要取决于转化供体菌株 和转 化受体菌株之间的亲源关系; d )通常情况下质粒的自然转化效率要高得多 2. 接合( conjugation ) 细菌通过性菌毛相互连接沟通,将质粒 或染色体的 DNA 从供体菌转移给受体菌 的过程,称为接合。 接合需要供菌与受菌之间通过中空的 管道(即性菌毛)连接将遗传物质从供菌 转移给受体菌。性菌毛的产生由质粒基因 编码。 接合机制 ( 大肠杆菌的接合机制 ) 接合作用是由一种被称为 F 因子的质粒介导。 F 因子又称为致育因子( Fertility factor ),大小约 100kb ,上面有编码细菌产生性菌毛及控制接合过程进行的 20 多个基因。这是最早发现的一种质粒 , 是大肠杆菌等决定 性别并有转移能力的质粒。 携带 F 质粒的菌株称为 F+ 菌株(相当于雄性),无 F 质粒的菌株称为 F- 菌株(相当于雌性)。 F 因子的三种细胞形式 F 因子既可以脱离染色体在细胞内 独立存在,也可与染色体相结合 的状态 (Hfr) 存在于细胞中 a ) F + 菌株 (“ 雄性”菌株 ) : F 因子 独立存在,细胞表面有性菌毛。 b ) Hfr 菌株( high frequency recombinant, Hfr ) : F 因子插入 到染色体 DNA 上,细胞表面有性菌 毛。 c ) F′菌株 : Hfr 菌株内的 F 因子 因不正常切割而脱离染色体时, 形成游离的但携带一小段染色体 基因的 F 因子,特称为 F′ 因 子。 细胞表面同样有性菌毛。
文档评论(0)