ABO血型正定型统一标准操作作业规程.docVIP

ABO血型正定型标准操作规程 一．目标：规范ABO血型正反定型操作。 二．适用范围：适适用于ABO血型正反定型。 三．支持性文件：全国临床检验操作规程第二版。 四．原理：依据红细胞上有或无A抗原或／和B抗原，将血型分为A型、B型、 AB型及O型。可利用红细胞凝集试验，经过正反定型正确判定ABO血型。 所谓正定型，是用已知抗A和抗B分型血清来测定红细胞上有没有对应A抗原或／和B抗原； 五．仪器：离心机。 六．试剂： 1．抗A、抗B分型血清；定时进行效价滴定,以保分型血清质量性能符合要求。抗A：1∶128，抗B：1∶128。 七．样本要求： 1．红细胞 可用针刺手指采血，并直接用生理盐水稀释制成5%红细胞悬液； 也可静脉采血，用1∶9枸橼酸钠抗凝．。 2．血清 取静脉血将血液沿管壁慢慢注入干燥试管中，待自然凝固后用玻璃 棒轻轻搅动血块，使之和试管壁分离。或置37℃水浴1小时，使血块收缩 离心分离血清。 八．操作步骤： 1．取洁净小试管3支，分别标明抗Ａ．抗Ｂ和抗A＋B，用滴管分别加抗Ａ．抗B和抗A＋B分型血清各1滴于试管底部，再以滴管分别加入受检者5%红细胞悬液1滴，混合。 2．另取洁净小试管3支，分别标明A、B和O细胞；用滴管分别加入受检者血清1滴于试管底部，再分别以滴管加入A、B和O型5%试剂红细胞悬液1滴，混合。 3．用离心机以1000r／min离心1分钟；或3400r/10秒。 4．将试管轻轻摇动，使沉于管底红细胞浮起，先以肉眼观察有没有凝集（溶血）现象。如肉眼不见凝集，应将反应物倒于玻片上，再以低倍镜检验。 5．观察结果时既要看有没有凝集，更要注意凝集强度，此有利于A、B亚型；类B或cisAB发觉。 6．凝集强度判定标准： 4＋＝红细胞凝集成一大块，血清清楚透明 3＋＝红细胞凝集成数小块，血清尚清 被判定血血型 抗A（B型） 抗B（A型） A 型 + — B 型 — + O型 — — AB型 + + 九．注意事项 1．观察结果时不可用力振摇； 2．严格按规程操作，避免操作失误，以免重新试验浪费时间和试剂； 3．试验结束后，试剂置2-6℃冰箱保留，以免试剂中免疫球蛋白变质 聚凝胺法交叉配血试验操作规程1.??目标：检出和判定意外抗体。 2.??原理：凝聚胺溶解后产生阳离子中和红细胞表面唾液酸使红细胞间距缩短，发生由IgG直接搭桥可逆非特异性凝集，当非特异性凝集回复时，只剩下由抗原抗体搭桥特异性凝集。3.??适用范围：配血。4.??所需材料：聚凝胺试剂、、洁净试管、滴管、离心机5.??操作程序：5.1??以生理盐水洗涤受血者和献血者红细胞1—3次，配成3-5%悬液。5.2??交叉配血试验：主侧：2滴患者血清加1滴供者3-5%RBC悬液。次侧：2滴供者血清加1滴患者3-5%RBC悬液。。5.3??每只试管加4滴低离子液，混合放置1分。5.4??分别加2滴Polybrene应用液，混合放置15秒。5.5??离心3400转/分15秒，弃上清，控干。5.6??观察管底有没有聚凝物，假如没有则需重做。5.7??每管各加2滴解聚液，轻轻混合10秒，观察结果并做统计。5.8??结果判定：10秒内若为Polybrene引发聚合应该会散开，判为阴性。若为抗原抗体引发凝聚则不会散开，判为阳性。6.??注意事项：6.1??能够用EDTA血浆替换血清6.2??加入解聚液后应该在3分钟之内观察结果6.3??解聚液不可多加，以免降低试验灵敏度