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基础实验技能培训 实验操作手册 2014-08 植物基因组DNA提取 实验材料： 植物样本，植物基因组DNA提取试剂盒，β-巯基乙醇，氯仿，无水乙醇 实验仪器、耗材：移液器、电泳仪、离心机、研钵、研钵棒、剪刀、天平、液氮 实验前准备： Buffer GP1在使用前请加入β-巯基乙醇，5 ml Buffer GP1加5 μl β-巯基乙醇。加入 β-巯基乙醇的Buffer GP1室温可保存1个月。 预热水浴锅 65度，将加入配制好的巯基乙醇预热。 第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。 称取植物样本约100 mg。 在研磨植物材料前，向研钵中倒入酒精，放入剪刀、钥匙高温消毒。 研钵、剪刀、钥匙冷却后，将液氮加入在研钵中以预冷研钵。 实验步骤： 取植物新鲜组织约100 mg，用剪刀将样本剪碎，放入研钵，加入液氮充分研磨至粉末状。将粉末转移到离心管中。 注意：冻存材料直接研磨，绝对不能化冻。而且粉末应在化冻前转移，否则内源性DNase有可能降解基因组DNA。 加入700 μl 65℃预热的Buffer GP1（Buffer GP1在使用前请加入β-巯基乙醇，5 ml Buffer GP1加5 μl β-巯基乙醇），迅速颠倒混匀后，将离心管置于65℃水浴20分钟，水浴过程中颠倒离心管混匀样品数次。 加入700 μl 氯仿，充分混